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| 大鼠胚胎脑源性神经干细胞的分离培养和鉴定 | |
| 引用本文： | 唐巍,王键,胡建鹏,陈业农,韩小祥,程红,俞丽华.大鼠胚胎脑源性神经干细胞的分离培养和鉴定[J].中国组织工程研究与临床康复,2006,10(11):36-38. |
| 作者姓名： | 唐巍 王键 胡建鹏 陈业农 韩小祥 程红 俞丽华 |
| 作者单位： | 1. 安徽中医学院,针灸骨伤临床学院康复教研室,安徽省,合肥市,230038 2. 安徽中医学院,中医临床学院中医基础理论教研室,安徽省,合肥市,230038 3. 安徽中医学院,中西医结合临床学院病理教研室,安徽省,合肥市,230038 4. 安徽中医学院,中医临床学院,安徽省,合肥市,230038 |
| 基金项目： | 安徽省自然科学研究项目基金(050430904)，安徽省教育厅自然科学研究项目基金(2006KJ382B)，北京中医药大学吕亚芳博士研究生科研资助基金~~ |
| 摘 要： | 目的:分离培养大鼠胚胎脑源性神经干细胞,并进行增殖分化鉴定。方法:实验于2005-06/12在中国科学技术大学生命科学学院周江宁研究室进行。①自孕14dWistar大鼠胚胎分离大脑皮质及皮质下组织,经机械吹打分离成单细胞后,利用无血清原代及传代培养方法,在添加重组人碱性成纤维细胞生长因子、重组人表皮生长因子和B27添加剂的DMEM/F12(1∶1)培养基中进行悬浮培养,获得具有克隆能力的细胞群;用有限稀释法,得到来源于同一细胞的亚细胞系克隆。②从培养基中撤除生长因子和B27添加剂,换成含体积分数为0.1的胎牛血清的DMEM/F12培养基,将培养的细胞球接种于预先铺有多聚赖氨酸盖玻片的培养皿,诱导分化。③以免疫荧光细胞化学技术,用神经干细胞的特异性单克隆抗体(巢蛋白)和增殖细胞单克隆抗体(5-溴脱氧尿苷嘧啶)鉴定克隆细胞,以鉴定神经干细胞的自我更新增殖能力。④以免疫荧光细胞化学技术,用神经细胞的特异性抗体(神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白、半乳糖脑苷脂)鉴定分化细胞,以鉴定神经干细胞的多向分化潜能。结果:①从胎鼠大脑皮质及皮质下分离的组织,经原代和传代培养均可形成细胞克隆,并具有增殖的能力,表达神经上皮干细胞蛋白抗原和增殖细胞抗原。②在血清诱导下,分化后的细胞表达神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞3种神经细胞的特异性抗原。结论:运用上述方法分离培养的细胞具有自我更新和增殖能力,并具有多向分化潜能和具有神经干细胞的特异性抗原。 |
| 关 键 词： | 神经干细胞 增殖 分化 细胞培养 |
| 文章编号： | 1671-5926(2006)11-0036-03 |
| 修稿时间： | 2006年2月22日 |
Isolation, culture and identification of brain-derived neural stem cells from rat's embryos |
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| Tang Wei,Wang Jian,Hu Jian-peng,Chen Ye-hong,Han Xiao-xiang,Cheng Hong,Yu Li-hua.Isolation, culture and identification of brain-derived neural stem cells from rat''''s embryos[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2006,10(11):36-38. | |
| Authors: | Tang Wei Wang Jian Hu Jian-peng Chen Ye-hong Han Xiao-xiang Cheng Hong Yu Li-hua |
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| Keywords: | |
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