| 实时荧光定量PCR方法检测急性髓系白血病FLT3基因mRNA的表达 |
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| 引用本文： | 唐家宏,徐兵,宋小燕,胡斌.实时荧光定量PCR方法检测急性髓系白血病FLT3基因mRNA的表达[J].广东医学,2008,29(3):377-379. |
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| 作者姓名： | 唐家宏 徐兵 宋小燕 胡斌 |
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| 作者单位： | 中国人民解放军第155医院;南方医科大学南方医院血液科,广州,510515;中山大学达安基因诊断中心,广州,510080 |
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| 摘 要： | 摘 要] 目的 构建检测急性髓细胞白血病FLT3基因mRNA表达的标准品重组质粒和荧光定量PCR方法，为进一步研究FLT3基因表达与急性髓细胞白血病的关系奠定基础。方法 利用引物设计软件设计出扩增FLT3基因的引物和特异性荧光探针。提取K562细胞株总RNA，经RT-PCR 扩增，产物纯化后与pUCm-T Vector连接，转化到大肠杆菌DH5α，筛选得到标准品的质粒FLT3P。 建立荧光定量PCR 检测 FLT3基因技术方法，建立标准曲线并检测15例初治AML患者。结果 重组质粒进行荧光定量PCR 扩增出现强烈的荧光值增长，表明FLT3 cDNA已成功克隆。以109～105copies/μl不同稀释水平的标准品进行荧光定量PCR 扩增, 所获得的Ct 值与标准品浓度的对数存在良好线性关系, 标准曲线回归系数为0.9998 。AML病例 FLT3表达水平显著高于正常对照组（p=0.017）， 且不同病例的表达水平存在较大差异。结论 成功构建用于定量检测FLT3 mRNA表达得荧光定量PCR的标准品和技术方法; AML病例 FLT3表达水平显著增高。
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| 关 键 词： | 白血病 髓细胞 急性 基因 FLT3 PCR 实时定量 |
| 收稿时间： | 2007-10-19 |
| 修稿时间： | 2007年10月19 |
The detection of FLT3 mRNA expression in patients with acute myeloid leukemia by real-time quantitative polymerase chain reaction amplification |
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| TANG Jia - hong, XU Bing, SONG Xiao - yah,et al..The detection of FLT3 mRNA expression in patients with acute myeloid leukemia by real-time quantitative polymerase chain reaction amplification[J].Guangdong Medical Journal,2008,29(3):377-379. |
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| Authors: | TANG Jia - hong XU Bing SONG Xiao - yah |
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| Institution: | TANG Jia - hong, XU Bing, SONG Xiao - yah, et al. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Leukemia myeloid acute Gene FLT3 Polymerase chain reaction real-time quantitative |
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