| HIV-1 HXB2株Tat蛋白在大肠杆菌中的分段表达及免疫原性分析 |
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| 引用本文： | 陈璐,潘卫,曹洁,卢海妹,何俊,蒋少华,唐萍,李存枚,廖文婷,邓松华.HIV-1 HXB2株Tat蛋白在大肠杆菌中的分段表达及免疫原性分析[J].安徽医科大学学报,2008,43(3):239-243. |
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| 作者姓名： | 陈璐 潘卫 曹洁 卢海妹 何俊 蒋少华 唐萍 李存枚 廖文婷 邓松华 |
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| 作者单位： | 1. 安徽医科大学病理生理教研室,合肥,230032
2. 第二军医大学微生物教研室,上海,200433 |
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| 基金项目： | 安徽省自然科学基金，安徽省教育厅自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的研究对人类免疫缺陷病毒Ⅰ型HXB2株调控蛋白Tat原核表达产生影响的区域和Tat蛋白重要的抗原表位。方法用PCR方法获得Tat(1-48aa)、Tat(22-72aa)和Tat(38-101aa)DNA片段,构建其原核表达质粒pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa),并转入E.coliBL21(DE3)中进行诱导表达及纯化,SDS-PAGE鉴定表达及纯化产物。采用间接ELISA方法用兔抗pET32a-Tat抗血清对三种肽段进行免疫原性分析。结果成功构建了pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa)质粒,分别表达出相对分子质量(Mr)为23×103、23×103和25×103的融合肽段,其浓度分别为4.26、3.35和5.11mg/ml。间接ELISA结果表明三种融合肽段与兔抗pET32a-Tat抗血清均呈特异性结合反应,其抗体滴度分别为1:128000、1:32000、1:64000,而抗血清与pET32a蛋白仅有较弱结合。结论半胱氨酸富集区(22-37位氨基酸)对Tat蛋白的原核表达有较显著影响;Tat蛋白的N端区、碱性区和C端区是其重要的抗原表位,其中N端区的免疫原性最强。
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| 关 键 词： | HIV-1/遗传学 大肠杆菌/遗传学 基因产物 tat/遗传学 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-1492(2008)03-0239-05 |
| 修稿时间： | 2008年1月11日 |
Segmentative expression of HIV-1 HXB2 subtype tat protein in E.coli and immunogenicity analysis of expressed peptides |
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| Chen Lu,Pan Wei,Cao Jie,et al.Segmentative expression of HIV-1 HXB2 subtype tat protein in E.coli and immunogenicity analysis of expressed peptides[J].Acta Universitis Medicinalis Anhui,2008,43(3):239-243. |
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| Authors: | Chen Lu Pan Wei Cao Jie |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HIV-1/genetics Escherichia coli/genetics gene products tat/genetics gene expression |
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