用荧光钙指示剂喹2测定人血小板胞浆游离钙浓度的方法 |
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引用本文: | 姜云飞,储钟禄,杨志铭,白岚.用荧光钙指示剂喹2测定人血小板胞浆游离钙浓度的方法[J].第二军医大学学报,1989(6). |
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作者姓名: | 姜云飞 储钟禄 杨志铭 白岚 |
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作者单位: | 第二军医大学生物化学教研室
(姜云飞,储钟禄,杨志铭),长征医院免疫室(白岚) |
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摘 要: | 我们采用荧光钙指示剂喹2,建立了测定人血小板胞浆游离钙浓度的方法,简报如下。 导入喹2的血小板悬液(QPS)的制备:将富含血小板血浆与10 μmol/L 喹2/AM混匀,置22℃水浴20 min,加入1μmol/L PGE_1,室温下430×g 离心 15 min,弃上层液。用1ml含1 μmol/L PGE_1和10μmol/L EGTA的HEPES无钙台氏缓冲液(HTB)使血小板悬浮并移至10ml体积已用HTB(含10 μmol/L EGTA)50ml平衡过的2%琼脂糖胶柱上,用相同缓冲液洗脱。过柱后将血小板悬液调至1×10~8血小板/ml和Ca~(2+)浓度至1 mmol/L,置22℃备用。对照血小板悬液(CPS)的制备:用等体积
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