| Acrp30基因的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 詹林盛,王会中,彭剑淳,王全立.Acrp30基因的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达[J].军事医学科学院院刊,2003,27(1):13-15,18. |
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| 作者姓名： | 詹林盛 王会中 彭剑淳 王全立 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院输血医学研究所,北京,100850 |
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| 摘 要： | 目的 :克隆人Acrp30基因 ,并在大肠杆菌中表达。方法 :提取人脂肪组织总RNA ,经RT_PCR扩增目的cDNA片段 ,进行核苷酸序列分析 ;将该基因克隆入原核表达载体pQE_30 ,在大肠杆菌M15中表达 ,用Ni2 + 固相化的螯合SepharoseFastFlow亲和层析纯化重组蛋白 ;并用Western印迹检测所制备多克隆抗体的特异性。结果 :从人脂肪组织总RNA中扩增得到 736bp的目的cDNA ,其序列与已报道的序列完全一致 ,并在大肠杆菌中成功获得高水平表达 ,蛋白相对分子质量大约为 30× 10 3,其表达量占菌体总蛋白的 15 %左右。重组蛋白经Ni2 + 固相化的螯合SepharoseFastFlow亲和层析纯化 ,纯度 >90 %。Western印迹试验证实所制备多克隆抗体具有较高特异性。结论 :本研究为进一步探讨Acrp30在肥胖症和糖尿病患者中的表达情况以及Acrp30的作用机制奠定基础
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| 关 键 词： | Acrp30 碱基序列 印迹法 蛋白质 大肠杆菌 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-5501(2003)01-0013-04 |
Molecular cloning,sequence analysis and expression in E.coli of Acrp30 gene |
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| ZHAN Lin_Sheng,WANG Hui_Zhong,PENG Jian_Chun,WANG Quan_Li.Molecular cloning,sequence analysis and expression in E.coli of Acrp30 gene[J].Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences,2003,27(1):13-15,18. |
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| Authors: | ZHAN Lin_Sheng WANG Hui_Zhong PENG Jian_Chun WANG Quan_Li |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Acrp30 base sequence blotting Western Escherichia coli gene expression |
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