脊髓缺血再灌注损伤后神经元凋亡与热休克蛋白：全部还是部分影响

目的：诱导抗细胞凋亡的热休克蛋白大量表达，观察其对兔热休克模型脊髓缺血再灌注损伤神经元凋亡的影响。方法：实验于2004-06／09在苏州大学附属第一医院骨科实验室完成。6～8个月新西兰大白兔66只，随机分为3组：①热休克组30只，先制成兔热休克模型，24h后再按脊髓缺血再灌注模型操作。②缺血组30只，单纯制成脊髓缺血再灌注模型。③假手术组6只。除不夹闭腹主动脉外，其余操作同缺血组。④实验过程：于再灌注后8，16，24，48，72h 5个时间点热休克组及缺血组各随机抽取6只兔（假手术组6只于8h取出）后肢运动功能进行评分（0分为全瘫，5分为正常）采用Jacob法。后肢运动功能评分后，处死兔并取L2-5。脊髓组织观察热休克蛋白70的表达量行免疫组织化学染色法，观察脊髓神经元凋亡情况采用原位缺口末端标记法染色法。计算脊髓前角神经元凋亡率[凋亡率=阳性神经元数／（阳性神经元数＋阴性神经元数）&;#215;100％]。结果：66只白兔均进入结果分析。①兔后肢运动功能Jacob评分：24，48，72h热休克组明显优于缺血组（t=2．825-2．953，P〈0．05）。②兔脊髓组织热休克蛋白表达情况：8，16，24，48h热休克组表达量显著高于缺血组（t=8．337～20．470，P〈0．01）。③兔脊髓灰质神经元凋亡结果：8，16，24h热休克组明显少于缺血组[（19．73&;#177;3．71）％比（20．87&;#177;3．33）％，（27．29&;#177;4．20）％比（36．05&;#177;5．20）％，（20．64&;#177;4．34）％比（35．28&;#177;4．27）％，（t=3．884～5．462，P〈0．05）]。结论：热休克蛋白可以明显抑制脊髓缺血再灌注损伤后的神经元凋亡，保护脊髓功能。同时提示热休克蛋白不能全方位地抑制神经元凋亡，部分神经元的凋亡对兔后肢运动不产生显著影响。