P2Y样G蛋白偶联受体GPR17参与缺糖缺氧诱导BV2小胶质细胞激活 |
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引用本文: | 张壮,黄静,赵冰,张霞燕,方三华,张纬萍,魏尔清,卢韵碧.P2Y样G蛋白偶联受体GPR17参与缺糖缺氧诱导BV2小胶质细胞激活[J].中国药理学与毒理学杂志,2012(3):460. |
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作者姓名: | 张壮 黄静 赵冰 张霞燕 方三华 张纬萍 魏尔清 卢韵碧 |
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作者单位: | 浙江大学医学院药理学系 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(81072618,81173041,30772561,30873053);浙江省“钱江人才计划”项目(2010R10055);中央高校基本科研业务费专项资金(2011QNA7015)资助 |
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摘 要: | 目的探讨P2Y样G蛋白偶联受体GPR17是否参与缺糖缺氧/恢复(OGD/R)诱导BV2小胶质细胞的激活。方法以OGD诱导BV2小胶质细胞激活,以MTT还原法检测细胞活性,以Western blotting和免疫细胞化学方法观察OGD/R后GPR17表达分布变化,以GPR17 siRNA沉默GPR17的表达,以RT-PCR检测GPR17敲低对OGD/R诱导的细胞因子表达的影响。结果 OGD 1 h后,BV2细胞形态由正常分支状变为阿米巴状,表明OGD可诱导细胞激活;Western blotting显示GPR17的蛋白表达随着OGD后恢复时间的延长而明显上调;免疫组化显示正常状态下GPR17主要表达在BV2细胞膜上,OGD/R后GPR17发生核移位;RT-PCR显示OGD/R后iNOS和IL-1β的mRNA水平明显升高;GPR17敲低可显著抑制OGD诱导的BV2细胞激活以及OGD 1 h/R 48 h后的细胞增殖和iNOS的mRNA合成。结论 GPR17参与缺糖缺氧诱导BV2小胶质细胞的激活。
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关 键 词: | 小胶质细胞 缺糖缺氧 激活 诱导细胞 蛋白表达 检测 受体 偶联 免疫细胞 细胞因子表达 |
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