| 抗人凝血因子Ⅷ-C1C2区单克隆抗体的制备及鉴定 |
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| 引用本文： | 张婷婷,赵益明,李振宇,沈飞,阮长耿.抗人凝血因子Ⅷ-C1C2区单克隆抗体的制备及鉴定[J].苏州大学学报(自然科学版),2010,30(1):106-109. |
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| 作者姓名： | 张婷婷 赵益明 李振宇 沈飞 阮长耿 |
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| 作者单位： | 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室; |
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| 基金项目： | 江苏省高校自然科学基金资助项目(08KJD310008); 江苏省卫生厅“科教兴卫工程”临床医学中心血液病开放课题基金资助项目(WKF07009) |
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| 摘 要： | 目的制备抗人凝血因子Ⅷ（FⅧ）C1C2区单克隆抗体（mAb）,并对其进行生化和生物学鉴定。方法采用基因重组技术表达FⅧ-C1C2区蛋白（rFⅧ-C1C2）,以rFⅧ-C1C2免疫8周龄Balb/C小鼠,小鼠脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后,ELISA法筛选阳性克隆,制备稳定分泌抗rFⅧ-C1C2mAb的细胞株,并对mAb进行生化和免疫学鉴定。结果获得一株抗rFⅧ-C1C2区单克隆抗体阳性克隆2B11,命名为SZ-133。琼脂糖双扩散鉴定为IgG1类,Westernblot法证实SZ-133可与rFⅧ-C1C2区蛋白及重组的全长FⅧ特异性结合,但不影响FⅧ的凝血活性。结论表达了rFⅧ-C1C2,并制备出了抗人凝血因子Ⅷ的单克隆抗体SZ-133,它能特异识别血浆及重组的FⅧ,有可能用于基础和临床应用研究。
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| 关 键 词： | 人凝血因子Ⅷ（FⅧ）C1C2区 原核表达 单克隆抗体 鉴定 |
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