| Nono蛋白的原核表达、纯化和多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 林玲,杨晓敏,吕京澴,韩晓.Nono蛋白的原核表达、纯化和多克隆抗体的制备[J].医学分子生物学杂志,2007,4(5):375-379. |
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| 作者姓名： | 林玲 杨晓敏 吕京澴 韩晓 |
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| 作者单位： | 江苏省人类功能基因组学重点实验室,南京医科大学生物化学与分子生物学系,南京市,210029 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.30370676)~~ |
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| 摘 要： | 目的表达和纯化带多聚组氨酸(6×His)标签的Nono(non-POU-domain-containing,octamer-bindingprotein)融合蛋白并制备抗Nono多克隆抗体。方法构建pET-28a( )-Nono重组表达质粒,转入Rosetta(DE3)大肠埃希菌,以IPTG诱导6×His-Nono融合蛋白表达,经镍离子金属螯合树脂纯化后,用纯化出的蛋白免疫BALB/C小鼠制备多克隆抗体,并用ELISA检测多克隆抗体的效价,Western印迹检测多克隆抗体的特异性。结果在大肠埃希菌中诱导出高水平表达的His-Nono融合蛋白,经亲和树脂纯化后免疫小鼠,获得了高特异性的抗Nono抗血清。结论成功构建pET-28a( )-Nono原核表达质粒,表达并纯化出高纯度的目标蛋白,制备出高滴度、高特异性的多克隆抗体。
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| 关 键 词： | COX-2基因 基因重组 融合蛋白 多克隆抗体 |
Prokaryotic Expression, Purification of Nono and Preparation of Its Polyclonal Antibody |
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| LIN Ling,YANG Xiaoming,LV Jinghuan,HAN Xiao.Prokaryotic Expression, Purification of Nono and Preparation of Its Polyclonal Antibody[J].Journal of Medical Molecular Biology,2007,4(5):375-379. |
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| Authors: | LIN Ling YANG Xiaoming LV Jinghuan HAN Xiao |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cyclooxygenase-2 genic recombination His-Nono fusion protein polyclonal antibody |
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