荧光原位杂交技术鉴定RP4质粒在序批式反应器活性污泥间的水平转移

目的为RP4质粒在序批式反应器活性污泥间的水平转移提供影像学证据。方法构建正常运行的序批式反应器,通过投加带有RP4质粒的供体菌实现质粒的水平转移。实验组分别用特异性标记氨氧化菌,RP4质粒的寡核苷酸探针进行杂交,再用4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)复染。对照组分别对纯培养的氨氧化菌,携带RP4质粒的供体菌和未投加供体菌的活性污泥进行相同的操作。通过荧光定量PCR技术对RP4质粒相对丰度变化情况进行验证。结果在实验组中发现了探针荧光的共定位现象,而对照组中均未发现荧光共定位现象。荧光定量PCR显示实验组污泥投加供体菌后RP4质粒相对丰度有所提高,差异有统计学意义(P0.05)。结论 RP4质粒可以在正常运行的序批式反应器的活性污泥间发生水平转移。