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人肠道病毒71型VPO蛋白的原核表达及多克隆抗体制备
引用本文:冯嫣芳,刘庆伟,库志强,闻洁君,单虎,黄忠. 人肠道病毒71型VPO蛋白的原核表达及多克隆抗体制备[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2011, 27(5)
作者姓名:冯嫣芳  刘庆伟  库志强  闻洁君  单虎  黄忠
作者单位:1. 青岛农业大学动物科技学院,山东,青岛,266109;中国科学院上海巴斯德研究所分子病毒学与免疫学重点实验室,上海,200025
2. 中国科学院上海巴斯德研究所分子病毒学与免疫学重点实验室,上海,200025
3. 青岛农业大学动物科技学院,山东,青岛,266109
基金项目:中国科学院"百人计划"项目,生化工程国家重点实验室开放基金项目
摘    要:目的:原核表达并纯化人肠道病毒71型(EV71)VPO蛋白,免疫豚鼠制备多克隆抗体,并鉴定其用于EV71检测的反应性和特异性.方法:PCR方法扩增VPO基因,构建原核表达质粒pET-VPO并转化大肠杆菌,诱导表达并纯化VPO重组蛋白,免疫豚鼠制备抗VPO多克隆抗体,ELISA方法检测抗VPO抗体效价,细胞免疫荧光和Western blot方法鉴定抗体特异性.结果:VPO重组蛋白在大肠杆菌BL21中高效表达,制备的抗VPO抗体效价为1:106.细胞免疫荧光及Western blot检测结果显示,抗VPO多克隆抗体可以识别原核表达及EV71感染细胞中的VPO蛋白.结论:原核表达了EV71的VPO蛋白并制备出抗VPO多克隆抗体,为EV71的临床诊断、疫苗开发和分子病毒学研究提供了新的研究工具和手段.

关 键 词:手足口病  人肠道病毒71型  多克隆抗体

Expression of VPO protein of enterovirus 71 in Escherichia coli and generation of the corresponding polyclonal antibodies in guinea pigs
FENG Yan-fang,LIU Qing-wei,KU Zhi-qiang,WEN Jie-jun,SHAN Hu,HUANG Zhong. Expression of VPO protein of enterovirus 71 in Escherichia coli and generation of the corresponding polyclonal antibodies in guinea pigs[J]. Chinese journal of cellular and molecular immunology, 2011, 27(5)
Authors:FENG Yan-fang  LIU Qing-wei  KU Zhi-qiang  WEN Jie-jun  SHAN Hu  HUANG Zhong
Abstract:
Keywords:VPO
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