琼脂糖微囊化猪胰岛异种移植治疗糖尿病的实验观察

背景：以往研究表明体外琼脂糖微囊化成猪胰岛具有一定的有效生物活性。但移植到动物体内后的生物活性还有待明确。 目的：观察实验性糖尿病大鼠腹腔内移植琼脂糖微囊化成猪胰岛治疗效果。 设计、时间及地点：对比观察实验，于2007-12/2008-12在郑州大学中心实验室完成。 材料：以琼脂糖作为制备微囊的材料，用相分离方法包被成猪胰岛。 方法：①将纯化后未微囊化胰岛及微囊化胰岛分置于RPMI1640 培养液培养， 隔日换液。收集培养第1天及第5天培养液上清，检测胰岛素含量。②解剖镜下挑选同一时间微囊的胰岛细胞，分别置于5.6 mmol/L 葡萄糖、16.6 mmol/L葡萄糖 和10.0 mmol/L茶碱溶液中，做静态孵育下的胰岛素刺激释放试验，放射免疫法测定胰岛素含量。③27只糖尿病大鼠随机分为3 组：对照组、未微囊化胰岛移植组、微囊化胰岛移植组，分别注入生理盐水、(0.9~1.6)×103个未微囊化成猪胰岛、(0.8~1.7)×103个微囊化成猪胰岛。 主要观察指标：微囊化胰岛培养液中基础胰岛素含量变化，微囊化胰岛对高糖与茶碱刺激的反应性，胰岛移植后糖尿病大鼠的生存期。 结果：微囊化胰岛在1个月的培养期间可持续分泌胰岛素。囊内细胞生长良好，微囊没有溶解和破碎。培养2 d的微囊化胰岛对高糖与茶碱刺激有明显反应，胰岛素释放量分别为低糖的1.96倍和2.58倍(P < 0.01)。移植后 7 d 时，3 组血糖分别为(21.61±1.21) mmol/L，(19.11±2.39) mmol/L 和(13.67±1.43) mmol/L，微囊化胰岛移植组与前2组相比差异均有显著性意义，且生存期明显长于前2组。 结论: 琼脂糖微囊化成猪胰岛可存活于糖尿病大鼠体内，并且具有有效生物活性。

Xenotransplantation of agarose-microcapsulated porcine islets for the treatment of diabetes mellitus