乙型肝炎病毒基因的巢式聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分型及初步应用 |
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引用本文: | 黄晶,高志良.乙型肝炎病毒基因的巢式聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分型及初步应用[J].中华检验医学杂志,2003,26(4):226-228. |
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作者姓名: | 黄晶 高志良 |
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作者单位: | 1. 510080,广州,广东省人民医院感染科 2. 中山大学附属三院传染科 |
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基金项目: | 卫生部优秀人才基金资助项目 ( 970 18) |
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摘 要: | 目的 用改进的乙型肝炎病毒(HBV)巢式聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCR—RFLP)的基因分型方法初探广州地区HBV基因型分布状态。方法 设计巢式PCR扩增前S基因,经限制性内切酶AvaⅡ和DpnⅡ酶切鉴别HBV A—G基因型;并对140份乙型肝炎患者血清进行基因分型,其中随机挑选3份进行克隆测序,并对20份患者血清进行巢式PCR—RFLP重复分型试验,以验证此分型技术的稳定性和特异性。同时采用PCR和巢式PCR对92份乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阴性血清进行HBV DNA阳性率检测比较。结果 基因分型与测序结果一致;基因分型重复试验符合率100%;92份HBeAg阴性血清经PCR和巢式PCR扩增HBV DNA的阳性率分别为20.7%和68.5%。140份乙型肝炎患者血清中HBV基因型以C型(94份)和B型(42份)为主,偶见A型(4份)。结论 巢式PCR—RFLP HBV基因分型方法具有良好的敏感性、特异性、稳定性,且操作简便,适用于临床和流行病学调查研究。
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关 键 词: | 乙型肝炎病毒 巢式聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 基因分型 |
修稿时间: | 2002年8月6日 |
HBV genotyping based on nested-PCR-RFLP and its primary clinical application |
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Abstract: | |
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Keywords: | Hepatitis B virus Genotype Restriction fragment length polymorphism |
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