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OGD增加小鼠离体海马组织内cPKCβII和nPKCε的膜转位
作者姓名:李华  贾军  韩松  李俊发
作者单位:首都医科大学基础医学院神经生物学系,首都医科大学基础医学院生理学系,首都医科大学基础医学院神经生物学系,首都医科大学基础医学院神经生物学系 北京100054
基金项目:国家自然科学基金(30270508,30470650),北京市自然科学基金(7032005),教育部优秀青年教师资助项目,北京市教委科技发展计划项目(KM200310025100)
摘    要:目的:通过观察无糖低氧(OGD)刺激对小鼠海马脑片内蛋白激酶C(PKC)特定亚型膜转位水平(激活程度)的影响,进一步证实我们在整体低氧预适应小鼠模型上所获实验结果,并为离体海马脑片缺血/低氧预适应(I/HPC)模型建立及后续药物干预实验打下基础。方法:急性分离小鼠海马组织、制备400!μm厚度的脑片,并用无糖低氧(OGD)人工脑脊液(ACSF)模拟缺血/低氧刺激;应用SDS-PAGE和Westernbolt等生化技术,并结合GelDoc凝胶成像系统,半定量检测OGD刺激2、5、10、15和30min后海马脑片内cPKCβII和nPKCε的膜转位水平。结果:OGD刺激可增高海马脑片内cPKCβII和nPKCε的膜转位水平,且这种增高从刺激5min开始持续至30min均有显著差异(P<0.001,n=6)。结论:实验结果进一步证实cPKCβII和nPKCε可能参与脑缺血/低氧性预适应的形成过程,并提示OGD10min作为制备离体海马脑片I/HPC模型的预处理刺激较为合理。

关 键 词:脑低氧预适应  蛋白激酶C  膜转位  海马脑片
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