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大鼠骨髓MSCs表面分子检测及诱导分化研究
引用本文:王刚,吕同德,马静,常雅萍.大鼠骨髓MSCs表面分子检测及诱导分化研究[J].中国实验诊断学,2008,12(1):12-15.
作者姓名:王刚  吕同德  马静  常雅萍
作者单位:1. 吉林大学基础医学院,免疫学教研室,吉林,长春,130021
2. 兰州军区总医院医学实验中心,甘肃,兰州,730Q50
摘    要:目的通过建立大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的体外分离培养方法,探讨大鼠MSCs表型特征以及多向分化潜能。方法利用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化SD大鼠骨髓MSCs,传代扩增,进行形态学观察,测定生长曲线。免疫细胞组织化学及流式细胞分析检测细胞表面分子的表达。定向诱导MSCs向脂肪细胞、成骨细胞及软骨细胞分化。结果原代分离的MSCs在接种后48h贴壁,细胞形态为椭圆形,多角形及短梭形,12天时细胞呈长梭形并达到90%单层融合。经传代扩增,细胞进一步纯化,细胞形态为均一的长梭形并呈漩涡状排列,而且生长速率加快,Pl代细胞群体倍增时间为20.3h。细胞免疫组化结果显示P2代细胞表面分子CD44、FN表达阳性,而CD14、CD34阴性,流式细胞检测CD44、FN阳性率分别为92.09%和90.55%。不同诱导剂定向诱导2周,经油红O、阿新兰及茜素红S染色鉴定,P3代MSCs分别向脂肪细胞,软骨细胞及成骨细胞分化。结论通过密度梯度离心结合贴壁筛选方法,体外分离培养的大鼠骨髓MSCs具有很强的增殖能力,并保持稳定的表型特征及多向分化潜能。

关 键 词:骨髓  间充质干细胞  细胞培养  鉴定  大鼠  大鼠骨髓  MSCs  表面  分子检测  诱导分化  研究  Isolation  in  vitro  stromal  cells  mesenchymal  derived  bone  marrow  differentiation  稳定  增殖能力  体外分离培养  筛选  密度梯度离心  成骨细胞分化  软骨细胞
文章编号:1007-4287(2008)01-0012-04
收稿时间:2007-06-22
修稿时间:2007年6月22日

Isolation,identification and multilineage differentiation of rat bone marrow derived multipotent mesenchymal stromal cells in vitro
WANG Gang, LU Tong-de, MA Jing,et al..Isolation,identification and multilineage differentiation of rat bone marrow derived multipotent mesenchymal stromal cells in vitro[J].Chinese Journal of Laboratory Diagnosis,2008,12(1):12-15.
Authors:WANG Gang  LU Tong-de  MA Jing  
Institution:WANG Gang, LU Tong-de, MA Jing, et al.
Abstract:
Keywords:bone marrow  mesenchymal stem cells  cell culture  identification  rat
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