EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞系中通过NF-κB、AP-1促进MMP9表达

目的 探讨EB病毒（Epstein-Barr Virus,EBV)LMP1是否通过NF－κB和AP－1促进MMP9表达,为全面阐明LMP1的分子致瘤机制提供实验依据。方法 将MMP9－CAT表达质粒导入HNE2－pSG5、HNE2－LMP1、HNE2－LMP1（1－185）、HNE2-LMP1(1-231)、HNE2－LMP1 Δ187-351鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC) 细胞系,比较各组细胞系的氯霉素乙酰转移酶（CAT）活性,以确定LMP1或其不同的结构域是否上调MMP9转录;采用明胶Zymography法检测上述细胞产生MMP9的活性,以确定LMP1或其不同的结构域是否促进MMP9蛋白表达;借助报道基因分析法确定在NPC中野生型LMP1能否激活NF－κB和AP－1的活性,进一步将突变了NF－κB或AP－1结合位点的MMP9－CAT表达质粒导入上述细胞系;比较相应的CAT活性,以确定LMP1或其不同的结构域是否通过NF－κB或AP－1上调MMP9表达。结果 与导入载体pCDNA3比较,HNE2－LMP1、HNE2－LMP1（1－185）、HNE2－LMP1（1－231）和HNE2－LMP1 Δ187－351 NPC细胞系CAT活性分别提高7.2,1.3,3.3和4．0倍。明胶Zymography法检测显示,在HNE2－LMP1、HNE2－LMP1（1－231）和HNE2－LMP1 Δ187－351细胞系中,均可检测到92000 MMP9活性,而HNE2－pSG5、HNE2－LMP1（1－231）几乎均为阴性。较之母细胞,野生型LMP1活化NF－κB及AP－1分别为13．8和8．4倍。导入NF－κB mut MMP9的HNE2－LMP1、HNE2－（1－231）和HNE2－LMP1 Δ187－351细胞系CAT活性,与导入MMP9－CAT相应的细胞系比较,分别下降至原有水平的18．1％、35．0％和29．1％;而导入AP－1 mut MMP9,则分别下降至原有水平的16．3％、33．3％5和26．1％,HNE2－pSG5、HNE2（1－185）影响不大。结论 LMP1 CTAR1与CTAR2可能通过NF－κB或AP－1促进MMP9表达,从而有助于NPC侵袭与转移。

Matrix metalloproteinase 9 expression is induced by Epstein-Barr virus LMP1 via NF-kappa B or AP-1 signaling pathway in nasopharyngeal carcinoma cells