前列腺癌特异突变DNA聚合酶β真核表达载体构建及鉴定 |
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作者姓名: | 王明臣 宋宇 张善锋 付蕾 文明 赵勤 金国平 赵国强 |
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作者单位: | 1. 郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,河南,郑州,450052 2. 郑州大学药学院生物化学与分子生物学教研室 3. 河南武警总队医院 4. 微生物与免疫学教研室 |
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基金项目: | 河南省科技厅自然科学基金 |
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摘 要: | 目的 构建前列腺癌(PCa)特异突变DNA聚合酶β(polβ)真核表达载体.方法 提取有特异DNA polβ突变的PCa组织的总RNA,通用引物逆转录成cDNA;用设计带有接头的DNA polβ全基因引物,PCR扩增PCa组织中呈现的突变型DNA polβ全基因;构建T-A克隆并进行重组体的筛选鉴定;亚克隆入表达载体pcDNA3.1并进行重组体的筛选和鉴定.结果 PCa特异突变DNA polβ基因扩增选择出P4(MI-polβ)和P5(M2-polβ)两个标本,构建重组有特定突变位点的polβ目的 基因的pcDNA3.1真核表达载体,经PCR扩增获得2个阳性集落.结论 经鉴定成功构建2例PCa特异突变DNA polβ真核表达载体(pcDNA3.1-M1 and peDNA3.1-M2).
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关 键 词: | 前列腺癌 DNA聚合酶β 基因突变 真核表达载体 DNA polymerase β |
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