血管内皮生长因子对骨髓瘤骨髓基质细胞分泌白细胞介素6的影响

背景:研究表明骨髓瘤细胞和骨髓基质细胞黏附后,可促进多种细胞因子如血管内皮生长因子、白细胞介素6的分泌,这些因子在促进肿瘤生长、浸润中起到关键作用.目的:观察血管内皮生长因子对多发性骨髓瘤患者骨髓基质细胞分泌白细胞介索6的影响.设计、时间及地点:对照观察,于2005-04/2007-04在大连医科大学附属二院血液实验室完成.对象:所有骨髓标本来源于大连医科大学附属二院血液科住院患者,多发性骨髓瘤患者18例,缺铁性贫血患者8例的骨髓为正常对照.血管内皮生长因子为R＆D公司产品.方法:上述对象每例抽取骨髓5 mL,贴壁法分离培养骨髓基质细胞.当细胞贴满瓶壁后传代,取2～3代细胞进行实验.分别向骨髓瘤骨髓基质细胞、正常骨髓基质细胞的悬液中加入含10%胎牛血清的IMDM培养液,按1×109 L-1密度接种,48 h后收集上清液待测.此外,分别以10,50,100μg/L血管内皮生长因子作用骨髓瘤骨髓基质细胞48h,另以100 μg/L血管内皮生长因子分别作用骨髓瘤骨髓基质细胞24,48,72 h,收集上清液待测.主要观察指标:倒置显微镜下观察细胞生长情况,流式细胞仪检测细胞表型.ELISA 法检测两种骨髓基质细胞培养上清液中的白细胞介素6浓度.ELISA法检测血管内皮生长因子作用于骨髓瘤骨髓基质细胞对分泌白细胞介素6的影响.结果:26例骨髓标奉均进入结果分析.①体外培养的骨髓基质细胞贴壁生长,平均4周融合为单层,传代后表现为成纤维细胞形态,其表型为CD54 ,CD33-,CD31-.②骨髓瘤骨髓基质细胞上清液中白细胞介素6的含量明显高于正常骨髓基质细胞(t=6.17,P<0.05).③分别以10,50,100 μg/L血管内皮生长因子作用骨髓瘤骨髓基质细胞48 h后,其上清液中白细胞介素6的含量逐渐升高,3种浓度间比较差异有显著性意义(F=218.19～1970.90,P<0.05).以100 μg/L血管内皮生长因子分别作用骨髓瘤骨髓基质细胞24,48,72 h后,其上清液白细胞介素6的含量逐渐升高,各时间点比较差异有显著性意义(F=92.86～1026.30,P<0.05).结论:骨髓瘤骨髓基质细胞在生长形态卜与正常骨髓基质细胞基本相似,但前者白细胞介素6的分泌却显著高于后者.血管内皮生长因子对骨髓瘤骨髓基质细胞的白细胞介素6分泌呈剂量、时间依赖性影响.

Influence of vascular endothelial growth factor on interleukin-6 secretion in myeloma bone marrow stromal cells