人组织型纤溶酶原激活剂牛乳腺生物反应器的研究

目的 构建组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)乳腺定位表达载体，使其在牛乳汁中高效表达，从而建立牛乳腺生物反应器。方法 RT-TD-PCR法克隆目的基因，通过酶切、连接、分离、纯化等方法构建含t-PA-cDAN的乳腺定位表达载体：采用显微注射法和乳腺注射法将融合基因转入小鼠的受精卵和小鼠及牛的乳腺组织中。结果 显微注射法和乳腺注射法转基因后，t-PA可在小鼠和牛的乳汁中表达。结论 所构建的乳腺定位表达载体可有效地使t-PA基因在小鼠和牛乳汁中表达，t-PA基因的表达不受转基因方法的影响，但t-PA在牛乳汁中的表达量明显高于小鼠的表达量。提示不同动物的乳蛋白调控系统有一定的差异，可能受着不同的因素或调控系统的影响。