| 携TGFβ 1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 姚欣,畅继武,李文录,马腾骧.携TGFβ 1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体的构建与鉴定[J].天津医科大学学报,2002,8(1):22-25. |
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| 作者姓名： | 姚欣 畅继武 李文录 马腾骧 |
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| 作者单位： | 1. 天津医科大学肿瘤医院盆腔泌尿科,天津,300060
2. 天津市泌尿外科研究所 |
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| 基金项目： | 天津医科大学科研基金资助项目 (编号2000KY18) |
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| 摘 要： | 目的 :构建携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体。方法 :以逆转录病毒 pRevTRE为载体 ,采用平末端连接法获得含人TGFβ1cDNA3’ -端活性肽编码基因正、反向插入的重组病毒质粒 ,脂质体介导转染包装细胞PA317,获得含TGFβ1正、反义RNA的复制缺陷型逆转录病毒载体 pRevTβ和 pRevTβ-AS ,感染NIH3T3细胞 ,测定病毒滴度。分别转染膀胱癌EJ细胞 ,通过Southern -blot和半定量RT -PCR方法评价载体整合及表达效率。结果 :pRevTβ、pRevTβ-AS载体病毒滴度分别为0.84、0.88×105CFU/ml,EJ细胞外源基因的整合率为100 %,正、反义基因转染细胞内TGFβ1mRNA的相对转录水平为1.89和0.35。结论 :构建的携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体符合细胞体外转染要求 ,能与肿瘤细胞高效整合 ,有效表达。
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| 关 键 词： | 转化生长因子β1 复制缺陷型逆转录病毒载体 反义RNA |
| 文章编号： | 1006-8147(2002)01-0022-04 |
| 修稿时间： | 2001年9月4日 |
Construction and evaluation of replication defective retroviral vectors carried sense or antisense RNA of TGFβ1 respectively |
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| YAO Xin,CHANG Ji-Wu,LI Wen-Lu,MA Teng-Xiang.Construction and evaluation of replication defective retroviral vectors carried sense or antisense RNA of TGFβ1 respectively[J].Journal of Tianjin Medical University,2002,8(1):22-25. |
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| Authors: | YAO Xin CHANG Ji-Wu LI Wen-Lu MA Teng-Xiang |
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