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CD34~+造血干/祖细胞在转hLIF基因腺病毒载体饲养层细胞中的扩增及其移植SCID小鼠的实验研究
引用本文:井莹莹,杨吉成,缪竞诚,盛伟华,胡志清,郁心,单云波,刘铁连,韩亚丽,包婉蓉,张日,朱南康. CD34~+造血干/祖细胞在转hLIF基因腺病毒载体饲养层细胞中的扩增及其移植SCID小鼠的实验研究[J]. 中国免疫学杂志, 2009, 25(5)
作者姓名:井莹莹  杨吉成  缪竞诚  盛伟华  胡志清  郁心  单云波  刘铁连  韩亚丽  包婉蓉  张日  朱南康
作者单位:1. 苏州大学医学部,细胞与分子生物学教研室,苏州,215123
2. 无锡中心血站,无锡,214021
3. 苏州大学附属第一医院血液科,苏州,215006
4. 苏州大学放射医学研究所,苏州,215007
基金项目:国防科工委基础科研计划 
摘    要:目的:建立转hLIF基因腺病毒载体的饲养层细胞,观察对CD34+造血干/祖细胞的扩增作用,并研究移植辐射损伤模型SCID小鼠的效果.方法:建立转hLIF基因腺病毒载体的饲养层细胞,并用RT-PCR法鉴定目的基因;采用免疫磁珠法分离脐带血CD34+造血干/祖细胞,流式细胞术检测纯度;将CD34+造血干/祖细胞与饲养层细胞共培养,流式细胞术检测各组增殖效果,建立辐射损伤模型SCID小鼠,将扩增后的CD34+造血干/祖细胞经CFDA SE荧光标记后移植入SCID小鼠体内,通过RT-PCR和观察荧光标记细胞来检测小鼠内的人源细胞.结果:建立的转基因饲养层细胞均有绿色荧光,RT-PCR法证实有目的基因表达,免疫磁珠法分离的CD34+造血干/祖细胞纯度可达(95.6±2.58)%,与饲养层细胞共培养后CD34+造血干/祖细胞可扩增13.2倍,表面粘附分子CXCR4和CD54表达量仍较高,移植入SCID小鼠四周后,仍可见带有荧光标记的人源细胞,RT-PCR证明人源基因Alu的存在.结论:建立的转hLIF基因腺病毒载体饲养层细胞可以有效地扩增CD34+造血干/祖细胞,延缓其分化,并且有较高的移植效率和造血活性.

关 键 词:腺病毒载体  造血干/祖细胞  SCID小鼠

The proliferation of umbilical cord blood CD34+ HSPC in transgenic cell strains of hLIF and the experimental study of engraftment in SCID mice
JING Ying-Ying,YANG Ji-Cheng,MIAO Jing-Cheng,SHENG Wei-Hua,HU Zhi-Qing,YU Xin,SHAN Yun-Bo,LIU Tie-Lian,HAN Ya-Li,BAO Wan-Rong,ZHANG Ri,ZHU Nan-Kang. The proliferation of umbilical cord blood CD34+ HSPC in transgenic cell strains of hLIF and the experimental study of engraftment in SCID mice[J]. Chinese Journal of Immunology, 2009, 25(5)
Authors:JING Ying-Ying  YANG Ji-Cheng  MIAO Jing-Cheng  SHENG Wei-Hua  HU Zhi-Qing  YU Xin  SHAN Yun-Bo  LIU Tie-Lian  HAN Ya-Li  BAO Wan-Rong  ZHANG Ri  ZHU Nan-Kang
Abstract:
Keywords:hLIF
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