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蛋白酶体抑制剂MG132诱导骨肉瘤细胞凋亡及其对p27Kip1蛋白表达的影响
引用本文:杨迪生,高翔,叶招明,陶惠民,李伟栩. 蛋白酶体抑制剂MG132诱导骨肉瘤细胞凋亡及其对p27Kip1蛋白表达的影响[J]. 中华骨科杂志, 2005, 25(10): 613-617
作者姓名:杨迪生  高翔  叶招明  陶惠民  李伟栩
作者单位:310009,杭州,浙江大学医学院附属第二医院骨科
摘    要:目的探讨蛋白酶体抑制剂Z-LLL-CHO(MG132)对人骨肉瘤MG-63细胞诱导凋亡的作用及其对p27Kip1蛋白表达的影响。方法分别以不同浓度的蛋白酶体抑制剂MG132培养p53突变型人骨肉瘤MG-63细胞、正常二倍体成纤维细胞WI-38和p53野生型人骨肉瘤U2OS细胞。通过MTT法检测不同培养时间的细胞增殖活力、琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡、流式细胞仪定量检测不同时间的细胞凋亡发生率、Westernblot检测p27Kip1表达情况。结果MG132能选择性抑制人骨肉瘤MG-63和U2OS细胞生长,IC50分别为(0.92±0.06)μmol/L及(0.33±0.05)μmol/L,均低于二倍体成纤维WI-38细胞(9.13±0.12)μmol/L。1μmol/LMG132处理MG-63细胞24h后,DNA琼脂糖凝胶电泳可检测到典型的“阶梯状”DNA条带,而WI-38细胞则为基因组DNA。流式细胞仪于1μmol/LMG132作用12h后检测到明显的亚G1峰(凋亡细胞峰),且存在时效关系。Westernblot发现,处理后p27Kip1蛋白表达明显上调。结论蛋白酶体抑制剂MG132在体外可选择性诱导人骨肉瘤MG-63细胞凋亡。p27Kip1蛋白在诱导MG-63细胞凋亡中可能起重要作用。

关 键 词:蛋白酶抑制药  骨肉瘤  细胞凋亡
收稿时间:2004-06-11
修稿时间:2004-06-11

Induction of apoptosis and accumulation of p27Kip1 protein by proteasome inhibitor MG132 in human osteosarcoma MG-63 cells
YANG Di-sheng,GAO Xiang,YE Zhao-ming,et al.. Induction of apoptosis and accumulation of p27Kip1 protein by proteasome inhibitor MG132 in human osteosarcoma MG-63 cells[J]. Chinese Journal of Orthopaedics, 2005, 25(10): 613-617
Authors:YANG Di-sheng  GAO Xiang  YE Zhao-ming  et al.
Affiliation:YANG Di-sheng,GAO Xiang,YE Zhao-ming,et al. Department of Orthopaedics,the Second Affiliated Hospital,Medical School of Zhejiang University,Hangzhou 310009,China
Abstract:
Keywords:Protease inhibitors  Osteosarcoma  Apoptosis  
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