miR-429及其目标基因HSPA4L在弱精症低活力精子中的表达

目的 探讨miR-429及其目标基因热休克蛋白A4L（HSPA4L）在弱精症患者低活力精子中的表达。方法 收集20份成年健康生育能力的精液标本和20份弱精症患者精液标本，按照 WHO第五版规定的精液分级标准，对液化后的精液进行常规参数分析；利用qRT-PCR检测精子中miR-429的表达水平；通过生物信息学手法预测miR-429 的靶点；构建HSPA4L 3′UTR双萤光素酶报告载体，采用双萤光素酶报告实验验证miR-429的靶基因；利用qRT-PCR和Western blot分别检测HSPA4L mRNA和蛋白的表达水平。结果 弱精症精子活力低于健康对照组，同时miR-429在弱精症精子中表达上调。通过生物信息学手法、双萤光素酶报告基因基检测以及转染实验发现miR-429 通过作用于HSPA4L 3′UTR来抑制HSPA4L mRNA和蛋白的表达。进一步的qRT-PCR分析发现弱精症组的HSPA4L mRNA和蛋白的表达水平下调，并且HSPA4L mRNA 表达水平与miR-429 的表达水平呈负相关（r=-0.725，P<0.05)。结论 miR-429在低活力精子中的表达上调，可能通过调控HSPA4L基因来影响精子的活力。

Expression of miR-429 and Its Target Gene HSPA4L in Sperms from Asthenospermia Patients