| RNA干扰技术抑制宫颈癌细胞低氧诱导因子-1表达的研究 |
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| 引用本文： | 闵敏,高国兰,聂春莲. RNA干扰技术抑制宫颈癌细胞低氧诱导因子-1表达的研究[J]. 中国肿瘤临床, 2009, 36(10). DOI: 10.3969/j.issn.1000-8179.2009.10.013 |
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| 作者姓名： | 闵敏 高国兰 聂春莲 |
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| 作者单位： | 南昌大学第一附属医院妇产科,南昌市,330006 |
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| 摘 要： | 目的:利用RNA干扰(RNAi)技术,使用特异的靶向作用HIF-1基因的小干扰RNA(siRNA)作用于宫颈癌细胞株SiHa,以了解siRNA对HIF-1基因的特异性抑制作用.方法:设计合成针对HIF-1的四个siRNA,鉴定无误后均借助脂质体转染宫颈癌细胞株SiHa.检测转染前后常氧和低氧培养的SiHa细胞中mRNA和蛋白的表达变化.筛选出抑制率最高的siRNA.用筛选出的siRNA转染SiHa细胞,检测转染前后常氧和低氧培养的SiHa细胞中不同时间点mRNA和蛋白的表达变化,验证RNAi作用的特异性及时效性.结果:H2siRNA引起常氧和低氧培养的SiHa细胞中HIF-1基因表达水平的下降最显著(P<0.05);将H2siRNA转染常氧和低氧培养的SiHa细胞,转染后24、48、72及96h均可观察到HIF-1基因的显著降低,均以48h时靶基因表达水平的下降最显著(P<0.05),对应的非靶基因无明显抑制作用.结论:针对HIF-1构建的四个siRNA对HIF-1基因的干扰效率不同.本实验中,常氧及低氧培养SiHa细胞均以H2siRNA对HIF-1表达水平的降低作用最明显.将H2siRNA作用于SiHa细胞,可引起靶基因特异、高效性抑制,常氧及低氧条件下至少维持到转染后96h,且均以48h时基因表达水平的下降最显著.在SiHa细胞株,HIF-1 siRNA通过下调HIF-1发挥抑制宫颈癌细胞生长的作用,RNAi技术可望为宫颈癌提供一种新的特异性基因治疗方法.
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| 关 键 词： | RNA干扰(RNAi) 小干扰RNA(siRNA) 宫颈癌 低氧诱导因子-1(HIF-1) |
HIF-1 Gene Expression Inhibited by RNAi in siHa Cervical Carcinoma Cells |
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| MIN Min,GAO Guolan,NIE Chunlian. HIF-1 Gene Expression Inhibited by RNAi in siHa Cervical Carcinoma Cells[J]. Chinese Journal of Clinical Oncology, 2009, 36(10). DOI: 10.3969/j.issn.1000-8179.2009.10.013 |
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| Authors: | MIN Min GAO Guolan NIE Chunlian |
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