新生豚鼠神经干细胞的分离培养及鉴定和标记

背景：神经干细胞为内耳移植治疗感音神经性聋带来希望，而豚鼠是氨基甙类药物中毒性耳聋动物模型的首选动物，且经过几十年研究已建立了成熟的动物模型。如何从豚鼠海马中提取神经干细胞并标记，是内耳干细胞移植所要解决的问题之一。 目的：从新生豚鼠海马中分离培养神经干细胞，为神经干细胞移植治疗感音神经性耳聋的实验研究创造条件。 设计：单一样本观察。 单位：郑州大学微生物与免疫教研室。 材料：实验于2005-03／06在郑州大学微生物与免疫教研室完成。新生24h内豚鼠（由郑州大学实验动物中心提供）50-80g／只，雌雄均有。 方法：分离新生豚鼠海马组织，用含碱性成纤维生长因子和表皮生长因子无血清培养技术培养神经干细胞，免疫组织化学技术检测其巢蛋白的表达。采用荧光染料DAPI标记神经干细胞。 主要观察指标：①观察神经干细胞体外生长情况。②免疫荧光检测鉴定神经干细胞巢蛋白表达。③荧光标记干细胞并检测标记率。 结果：①从新生豚鼠海马组织分离出的细胞中可获得呈集落样生长的神经干细胞团。②神经干细胞能表达巢蛋白。③荧光染料DAPI的标记效率可达93．4％，细胞传代8次后荧光亮度仍无明显衰减。 结论：从新生豚鼠海马分离的细胞具有明显的增殖能力，荧光染料的标记可获得较高的标记效率，可作为神经干细胞移植治疗感音神经性耳聋实验研究的供体细胞。

Isolation, culture, identification and labeling of neural stem cells from newborn guinea pigs