| 人骨肉瘤9901细胞cDNA表达文库的构建和鉴定 |
| |
| 引用本文： | 廖博,马保安,张惠中,龙华,范德刚,范清宇.人骨肉瘤9901细胞cDNA表达文库的构建和鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志,2003,19(6):598-600. |
| |
| 作者姓名： | 廖博 马保安 张惠中 龙华 范德刚 范清宇 |
| |
| 作者单位： | 第四军医大学唐都医院骨科,陕西,西安,710038 |
| |
| 摘 要： | 目的:构建骨肉瘤9901细胞cDNA表达文库,为筛选骨肉瘤特异性抗原创造条件。方法:从9901细胞中提取总RNA,分离mRNA,反转录合成双链cDNA,末端削平,和EcoR I适配子连接。磷酸化EcoR I适配子5’端,过Sephacryl一S400柱除去小于400 bp的cDNA片段,与噬菌体λgt11(载体)连接,用包装蛋白体外包装后形成初级cDNA文库。取适量包装体系倍比稀释后感染E.coli Y1090,测定文库克隆数、重组率,用PCR法测定cDNA插入片段的大小。最后扩增cDNA文库。结果:建成含1.5×106个重组子的骨肉瘤9901细胞cDNA表达文库,重组率为94.3％。重组子中插入的外源片段不小于 0.5 kb,平均长约1.4 kb。结论:达到良好文库的质量标准,适合进一步筛选目的cDNA克隆。
|
| 关 键 词： | 骨肉瘤 反转录 cDNA文库 |
| 文章编号： | 1007-8738(2003)06-0598-03 |
| 修稿时间： | 2003年3月21日 |
Construction and characterization of osteosarcoma 9901 cell cDNA library |
| |
| LIAO Bo,MA Bao-an,ZHANG Hui-zhong,LONG Hua,FAN De-gang,FAN Qing-yu.Construction and characterization of osteosarcoma 9901 cell cDNA library[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2003,19(6):598-600. |
| |
| Authors: | LIAO Bo MA Bao-an ZHANG Hui-zhong LONG Hua FAN De-gang FAN Qing-yu |
| |
| Institution: | Department of Orthopedics, Tangdu Hospital, Fourth Military Medical University, Xi'an 710038, China. liaobo_@163.com |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
