| 靶向Plk1基因的shRNA对肝癌BEL-7402细胞株生物学行为及化疗增敏的影响 |
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| 引用本文： | 郑核,钟德玝,何自力,苗雄鹰,文宇,刘威,陈广. 靶向Plk1基因的shRNA对肝癌BEL-7402细胞株生物学行为及化疗增敏的影响[J]. 中国现代手术学杂志, 2012, 16(1): 2-7 |
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| 作者姓名： | 郑核 钟德玝 何自力 苗雄鹰 文宇 刘威 陈广 |
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| 作者单位： | 1. 湖南省邵阳市中心医院,邵阳,422000
2. 中南大学湘雅二医院,长沙,410011 |
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| 基金项目： | 邵阳市科技计划项目(CO968)资助课题 |
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| 摘 要： | 目的 利用RNA干扰技术(RNAi),研究表达Polo-like kinase 1 (Plk1)的短发夹RNA (shRNA)载体对肝癌细胞株BEL-7402生物学行为及对化疗药物长春新碱敏感性的影响. 方法 根据靶基因的不同区域构建针对Plk1mRNA的两组干扰质粒shRNA-Plk1:Plk1siRNA-251,Plk1siRNA-1396以及阴性对照质粒Plk1siRNA-hk,利用电穿孔法转染入肝癌细胞株BEL-7402,用长春新碱处理细胞后,用MTT法检测四组细胞的生长抑制率,计算IC50值,流式细胞仪检测各组细胞凋亡. 结果 半定量RT-PCR检测Plk1siRNA-251,Plk1siRNA-1396组Plk1mRNA、Cdc25CmRNA表达较Plk1siRNA-hk转染组与空白对照组明显下降(P＜0.01),p53mRNA表达增加.长春新碱处理后,Plk1siRNA-251组和Plk1siRNA-1396组与BEL7402组之间的生长抑制率有显著性差异(P＜0.01).5 μg/ml浓度长春新碱作用24h后,Plk1siRNA-251组和Plk1siRNA-1396组凋亡指数分别为19.09％ ±3.97％、19.80％ ±5.47％明显高于Plk1siRNA-hk组和BEL7402组(P＜0.01).结论 成功筛选出两条能特异而高效抑制Plk1基因表达的shRNA,可以显著抑制Plk1 mRNA、Cdc25CmRNA及Plkl蛋白的表达,并使p53mRNA表达增高,并明显抑制细胞增殖,能增加长春新碱的化疗敏感性,从而为进一步研究该基因的功能和作用机制提供了新的手段.
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| 关 键 词： | 肝肿瘤,实验性 RNA干扰 长春新碱 |
Study of the Influence of siRNA Targeting Plk1 Gene on the Biological Behaviors and Enhancement of Vincristine Chemotherapeutic Sensitivity to Hepatocellular Carcinoma Cell Line BEL-7402 |
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| ZHENG He , ZHONG De-wu , HE Zi-li , MIAO Xiong-ying , WEN Yu , LIU Wei , CHEN Guang. Study of the Influence of siRNA Targeting Plk1 Gene on the Biological Behaviors and Enhancement of Vincristine Chemotherapeutic Sensitivity to Hepatocellular Carcinoma Cell Line BEL-7402[J]. Chinese Journal of Modern Operative Surgery, 2012, 16(1): 2-7 |
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| Authors: | ZHENG He ZHONG De-wu HE Zi-li MIAO Xiong-ying WEN Yu LIU Wei CHEN Guang |
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| Affiliation: | (Shaoyang Center Hospital,Shaoyang 422000,Hunan,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | liver neoplasms,experimental RNA interference vincristine |
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