siRNA沉默PTP4A1表达对人舌鳞癌细胞系TCA8113体内外生物学行为的影响 |
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引用本文: | 漆小娟,季平,潘丽,时恩来,徐望.siRNA沉默PTP4A1表达对人舌鳞癌细胞系TCA8113体内外生物学行为的影响[J].第三军医大学学报,2013,35(13):1379-1383. |
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作者姓名: | 漆小娟 季平 潘丽 时恩来 徐望 |
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作者单位: | 400016重庆,重庆医科大学附属口腔医院颌面外科,重庆市口腔疾病与生物医学研究中心 |
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摘 要: | 目的 探讨特异性沉默人舌鳞癌细胞系TCA8113中PTP4A1基因的表达,并研究沉默该基因表达后对TCA8113细胞体内外生物学行为的影响.方法 采用siRNA的慢病毒载体siRNA-PTP4A1作为阳性干扰组(KD),空病毒载体作为阴性对照组(NC),未作任何处理的TCA8113细胞作为空白对照组(CON).Real-time PCR和Westem blot检测PTP4A1基因的干扰效果,MTT法检测3组细胞的增殖能力,流式细胞技术分析3组细胞凋亡和细胞周期情况,平板克隆形成实验检测体外克隆形成能力,Western blot分别检测3组细胞抑制凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax的表达情况,3组细胞分别裸鼠成瘤后观察移植瘤的生长情况.结果 siRNA-PTPA1转染TCA8113细胞成功,Real-time PCR和Western blot 检测PTP4A1基因的抑制率达到55%和60%以上(P <0.05);MTT结果显示KD组细胞增殖能力小于NC、CON组;细胞凋亡率也明显增加,KD组早期凋亡为(17.48 ±0.70)%,而NC、CON组的早期细胞凋亡率为(7.34±0.70)%和(4.86±0.25)% (P <0.01);KD组细胞周期阻滞在G1/G0和S期(P<0.05);Western blot结果显示Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01),Bax蛋白表达增高(P<0.01);KD组体外克隆形成数小于NC、CON组(P<0.01);KD组裸鼠移植瘤的生长速度缓慢,质量和体积均小于NC、CON组(P<0.0l).结论 siRNA PTP4A1在体内外均能有效抑制舌鳞癌TCA8113细胞的恶性生物学行为,PTP4A1基因可能与舌鳞癌的发生、发展相关.
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关 键 词: | TCA8113 PTP4A1 siRNA 生物学行为 |
Effect of silencing PTP4A1 gene by lentiviral vector-mediated siRNA on biological behavior of TCA8113 cells in vivo and in vitro |
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Abstract: | |
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Keywords: | TCA8113 PTP4A1 siRNA biological behavior |
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