Rap1蛋白在卵巢浆液性癌组织中的表达及抑制细胞增殖的研究 |
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引用本文: | 肖正华,高一萌,彭慧娟,张瑜,罗淑娟,令狐华. Rap1蛋白在卵巢浆液性癌组织中的表达及抑制细胞增殖的研究[J]. 第三军医大学学报, 2013, 35(17): 1801-1804 |
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作者姓名: | 肖正华 高一萌 彭慧娟 张瑜 罗淑娟 令狐华 |
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作者单位: | 1. 400016重庆,重庆医科大学附属第一医院妇产科;402160重庆,重庆医科大学附属永川医院妇产科 2. 重庆医科大学附属第一医院妇产科,重庆,400016 |
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基金项目: | the National Natural Science Foundation of China,国家自然科学基金 |
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摘 要: | 目的 探讨卵巢浆液性癌组织中Rap1蛋白表达及其在浆液性癌细胞增殖中的作用.方法 Western blot检测并比较Rap1在浆液性卵巢癌组织、卵巢良性组织和正常卵巢组织中的表达;应用RNA干扰技术构建3个Rapl shRNA真核表达载体,将3个重组质粒、空质粒、阴性质粒分别转染进卵巢癌细胞株SKOV3,通过Western blot对重组质粒进行有效性筛选,G418筛选建立SKOV3-Rap1-RNAi稳定转染细胞株;MTT法检测Rap1表达缺失的SKOV3细胞增殖能力的变化.结果 与卵巢良性组织和正常卵巢组织相比,浆液性卵巢癌组织中Rap1呈现高表达(P<0.05).经双酶切和DNA测序证实成功构建了3个重组质粒pSUPER.retro.neo/GFP-Rap1i-#1,-Rap1i-#2及-Rap1i-#3;瞬时转染提示上述3个质粒的Rap1抑制效率分别是50%、66%、19%,遂最终采用pSUPER.retro.neo/GFP-Rap1i-#2转染并用G418筛选出单克隆细胞Rap1i-1和Rap1i-2,其Rap1蛋白抑制率分别为70%和48%,选取Rap1i-1细胞进一步检测Rap1表达缺失的SKOV3细胞增殖能力的变化,发现其增殖能力较对照组更强(P<0.05).结论 Rap1蛋白在卵巢浆液性癌组织中呈高表达并抑制细胞增殖.
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关 键 词: | 浆液性卵巢癌 Rap1 肿瘤增殖 |
Rap1 expression in serous ovarian cancer and its inhibitory effect on cell proliferation |
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Abstract: | |
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Keywords: | human serous ovarian cancer Rap1 tumor growth |
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