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Rap1蛋白在卵巢浆液性癌组织中的表达及抑制细胞增殖的研究
引用本文:肖正华,高一萌,彭慧娟,张瑜,罗淑娟,令狐华. Rap1蛋白在卵巢浆液性癌组织中的表达及抑制细胞增殖的研究[J]. 第三军医大学学报, 2013, 35(17): 1801-1804
作者姓名:肖正华  高一萌  彭慧娟  张瑜  罗淑娟  令狐华
作者单位:1. 400016重庆,重庆医科大学附属第一医院妇产科;402160重庆,重庆医科大学附属永川医院妇产科
2. 重庆医科大学附属第一医院妇产科,重庆,400016
基金项目:the National Natural Science Foundation of China,国家自然科学基金
摘    要:目的 探讨卵巢浆液性癌组织中Rap1蛋白表达及其在浆液性癌细胞增殖中的作用.方法 Western blot检测并比较Rap1在浆液性卵巢癌组织、卵巢良性组织和正常卵巢组织中的表达;应用RNA干扰技术构建3个Rapl shRNA真核表达载体,将3个重组质粒、空质粒、阴性质粒分别转染进卵巢癌细胞株SKOV3,通过Western blot对重组质粒进行有效性筛选,G418筛选建立SKOV3-Rap1-RNAi稳定转染细胞株;MTT法检测Rap1表达缺失的SKOV3细胞增殖能力的变化.结果 与卵巢良性组织和正常卵巢组织相比,浆液性卵巢癌组织中Rap1呈现高表达(P<0.05).经双酶切和DNA测序证实成功构建了3个重组质粒pSUPER.retro.neo/GFP-Rap1i-#1,-Rap1i-#2及-Rap1i-#3;瞬时转染提示上述3个质粒的Rap1抑制效率分别是50%、66%、19%,遂最终采用pSUPER.retro.neo/GFP-Rap1i-#2转染并用G418筛选出单克隆细胞Rap1i-1和Rap1i-2,其Rap1蛋白抑制率分别为70%和48%,选取Rap1i-1细胞进一步检测Rap1表达缺失的SKOV3细胞增殖能力的变化,发现其增殖能力较对照组更强(P<0.05).结论 Rap1蛋白在卵巢浆液性癌组织中呈高表达并抑制细胞增殖.

关 键 词:浆液性卵巢癌  Rap1  肿瘤增殖

Rap1 expression in serous ovarian cancer and its inhibitory effect on cell proliferation
Abstract:
Keywords:human serous ovarian cancer  Rap1  tumor growth
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