| 人BNIP3基因真核表达载体的构建及其对HT-29细胞化疗敏感性的影响 |
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| 引用本文： | 裴莉,边志衡,江恒,陈克力,陈建芳,梁后杰. 人BNIP3基因真核表达载体的构建及其对HT-29细胞化疗敏感性的影响[J]. 第三军医大学学报, 2013, 35(15): 1548-1551 |
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| 作者姓名： | 裴莉 边志衡 江恒 陈克力 陈建芳 梁后杰 |
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| 作者单位： | 1. 第三军医大学西南医院血液科,重庆,400038
2. 第三军医大学西南医院肿瘤科,重庆,400038 |
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| 基金项目： | the Key Project of Natural Science Foundation of Chongqing，重庆市自然科学基金重点项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建人BNIP3真核表达载体,观察BNIP3高表达对人结肠癌细胞HT-29化疗敏感性的影响.方法 PCR法扩增BNIP3基因,酶切后插入质粒pEGFP-C3,构建重组真核表达载体pEGFP-C3/BNIP3.脂质体转染人结肠癌细胞HT-29,Western blot检测BNIP3蛋白表达.MTT法检测5-氟尿嘧啶(5-Fu)的化疗敏感性和细胞增殖,AnnexinV-APC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡.结果 酶切电泳分析和DNA序列测定证实,重组质粒pEGFP-C3/BNIP3构建成功；转染重组质粒的HT-29细胞BNIP3蛋白明显高表达.与未转染组和转染空质粒pEGFP-C3组比较,转染pEGFP-C3/BNIP3组5-Fu的IC50值显著降低[(120.11 ±5.45)、(113.40 ±4.72) μg/mL vs (19.08 ±2.62) μg/mL,P＜0.05],细胞凋亡率显著增加[(5.51±0.32)％、(7.19±0.47)％vs (41.72±1.48)％,P＜0.05],细胞克隆形成显著减少[(52±6)、(49±5)vs(11±3),P＜0.05],细胞增殖速度减慢.结论 成功构建了人BNIP3真核表达载体,BNIP3高表达可增加HT-29细胞对5-Fu的化疗敏感性.
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| 关 键 词： | 结肠肿瘤 HT-29细胞 BNIP3基因 化疗 凋亡 表达载体 |
Construction of human BNIP3 eukaryotic expression vector and its effect on chemosensitivity of HT-29 cells |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | colon neoplasm HT-29 cell BNIP3 gene chemotherapy apoptosis expression vector |
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