β-TrCP1和HAUSP影响胶质母细胞瘤细胞增殖和侵袭并调控UHRF1蛋白水平 |
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作者姓名: | 李玉辉 赵喜庆 陆丽娟 刘艳坤 刘岩 胡万宁 李玉凤 |
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作者单位: | 1. 063001 唐山市人民医院神经外科
2. 063210 唐山,华北理工大学研究生院
3. 063001 唐山市人民医院肿瘤研究所
4. 4063210 唐山,华北理工大学生命科学院生物工程系 |
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基金项目: | 唐山市科技创新团队培养计划项目(17130205D) |
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摘 要: | 目的分析β-转导重复相容蛋白(β-TrCP1)和疱疹病毒相关性泛素特异性蛋白酶(HAUSP)对胶质母细胞瘤增殖和侵袭能力以及表观遗传调控因子UHRF1表达的影响。
方法胶质母细胞瘤U87细胞内分别转染N1空质粒(NC组)和β-TrCP1-N1过表达质粒(β-TrCP1组),以及分别转染无意义siRNA序列(siRNA阴性对照,si-NC组)和靶向HAUSP mRNA的siRNA(si-HAUSP组)。RT-qPCR法和Western blot法分别检测各组细胞中β-TRCP1、HAUSP和UHRF1的mRNA以及蛋白水平。CCK8法和基质胶-transwell侵袭实验分别检测各组细胞的增殖和侵袭能力。
结果质粒转染后第4天和第5天,β-TrCP1组细胞的增殖能力显著低于同时期的NC组细胞(均P<0.05);转染第4天,β-TrCP1组穿过基质胶的细胞数显著低于NC组细胞(P<0.05)。转染siRNA后第4天和第5天,si-HAUSP组细胞的增殖能力显著低于同时期si-NC组细胞(P<0.05);转染si-HAUSP 4 d,si-HAUSP组穿过基质胶的细胞数显著低于si-NC组(P<0.05)。此外,过表达β-TrCP1和敲低HAUSP均不影响UHRF1的mRNA水平(均P>0.05),但均可降低UHRF1蛋白水平(均P<0.05)。
结论过表达β-TrCP1和敲低HAUSP均可抑制胶质母细胞瘤U87细胞的增殖和侵袭能力,同时降低UHRF1蛋白水平。UHRF1蛋白水平改变可能是β-TrCP1和HAUSP影响胶质母细胞瘤增殖和侵袭能力的机制之一。
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关 键 词: | 胶质母细胞瘤 β-转导重复相容蛋白 疱疹病毒相关性泛素特异性蛋白酶 UHRF1 |
收稿时间: | 2019-04-17 |
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