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| miRNA-1236通过靶向FOXO3a调控结直肠癌细胞增殖的作用及机制研究 | |
| 作者姓名： | 孙宇 朱琳 刘祯璐 杨明 余贞 孙静 王妍 蒋雨含 李红岩 孙辉 |
| 作者单位： | 1. 150081 哈尔滨医科大学药学院 2. 150081 哈尔滨医科大学基础医学院 3. 150081 哈尔滨，黑龙江中医药大学附属第一医院 4. 150081 哈尔滨医科大学药学院；150001 哈尔滨医科大学药学院 药学实验中心 |
| 基金项目： | 哈尔滨医科大学创新科学研究基金(No.2016JCZX55); 黑龙江省大学生创新创业训练计划项目(No.201810226069) |
| 摘 要： | 目的探讨miRNA-1236对结直肠癌细胞增殖的作用及其相关机制。
方法通过实时定量PCR检测转染miR-1236后miRNA-1236的表达，使用CCK-8以及克隆形成方法检测转染miRNA-1236后HCT116细胞的活性，ki67方法检测转染miRNA-1236后HCT116细胞增殖能力的变化，生物信息方法筛选miR-1236的潜在靶基因FOXO3a。Luciferase报告检测miRNA-1236与FOXO3a的结合位点，通过实时定量PCR方法检测转染miRNA-1236后FOXO3a基因的变化；通过免疫组化的方法检测结直肠癌患者组织中FOXO3a的表达，通过western blot检测低表达miRNA-1236后HCT116细胞中FOXO3a、PCNA以及Bax蛋白的变化。通过TCGA数据库检测FOXO3a基因在结直肠癌患者癌-癌旁，不同肿瘤阶段与不同性别中的表达。
结果本研究发现高表达miRNA-1236后HCT116细胞活性相对于阴性对照组明显增加，而低表达miRNA-1236后活性降低。低表达miRNA-1236后HCT116细胞增殖能力相对于阴性对照组明显降低。生物信息学预测miR-1236与FOXO3a有潜在的结合位点。采用Western blot以及逆转录实时定量PCR验证，过表达miRNA-1236后FOXO3a表达相对于阴性对照组明显降低，而低表达miRNA-1236后，FOXO3a表达明显升高，同时luciferase结果显示，FOXO3a是miRNA-1236的靶基因。并且，FOXO3a在结直肠癌症组织中明显降低。
结论miR-1236通过靶向FOXO3a的表达调节结直肠癌细胞HCT116增殖，同时为miR-1236成为诊断、预防以及治疗结直肠癌的生物学标记物提供理论基础。 |
| 关 键 词： | 结直肠肿瘤 miR-1236 FOXO3a 增殖 |
| 收稿时间： | 2018-06-17 |
The effect and mechanism of miRNA-1236 suppresses colorectal cancer cell proliferation by targeting FOXO3a |
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| Authors: | Yu Sun Lin Zhu Zhenlu Liu Ming Yang Zhen Yu Jing Sun Yan Wang Yuhan Jiang Hongyan Li Hui Sun |
| Institution: | 1. College of Pharmacy, Harbin Medical University, Harbin 150081, China 2. College of Basic Medical, Harbin Medical University, Harbin 150081, China 3. Traditional Chinese Medicine University of Heilongjiang, Harbin 150081, China 4. College of Pharmacy, Harbin Medical University, Harbin 150081, China; Pharmaceutical Experiment Teaching Center, College of Pharmacy, Harbin Medical University, Harbin 150001, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Colorectal neoplasms miRNA-1236 FOXO3a Proliferation |
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