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色素上皮细胞衍生因子表达载体的构建
引用本文:杨楠,姚密河,张桂荣,杨翰仪. 色素上皮细胞衍生因子表达载体的构建[J]. 免疫学杂志, 2006, 22(1): 98-100,103
作者姓名:杨楠  姚密河  张桂荣  杨翰仪
作者单位:1. 解放军210医院眼科,大连,116021
2. 第二炮兵51基地531医院,吉林通化,134002
3. 吉林大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,长春,130021
摘    要:目的 构建色素上皮细胞衍生因子(PEDF)的表达载体。方法 从孕8周的胚胎绒毛中提取总RNA,经RTPCR扩增,获得编码人PEDF的全基因序列,采用T-A克隆法,将PEDF基因克隆入PMD18-T中间载体并转化人大肠杆菌E.coli JM109中,提取重组质粒并酶切鉴定,将鉴定正确的质粒命名为PMD18-T/PEDF,DNA测序,测序正确后构建重组表达载体pET28a/PEDF,转化大肠杆菌E.coli DH5α并酶切鉴定。结果 重组表达载体pET28a/PEDF在大肠杆菌E.coli DH5α中克隆表达。结论 构建了PEDF重组表达载体pET28a/PEDF,为重组PEDF的进一步表达及纯化奠定了基础。

关 键 词:色素上皮细胞衍生因子  克隆  表达  载体
文章编号:1000-8861(2006)01-0098-04
收稿时间:2004-09-06
修稿时间:2004-09-062004-12-28

Gene cloning of human pigment epithelium-derived factor in E.coli DH5α
YANG Nan,YAO Mi-he,ZHANG Gui-rong,YANG Han-yi. Gene cloning of human pigment epithelium-derived factor in E.coli DH5α[J]. Immunological Journal, 2006, 22(1): 98-100,103
Authors:YANG Nan  YAO Mi-he  ZHANG Gui-rong  YANG Han-yi
Affiliation:Department of Ophthalmology, No. 210 Hospital of PLA, Dalian 116021, China
Abstract:
Keywords:Pigment epithehum derived factor   Clone   Expression   Vector
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