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DNA甲基转移酶1、3b基因共下调对人胆管癌细胞生长的抑制效应
引用本文:左石,罗剑,刘民锋,徐立宁,董泾青,郭伟,邹声泉.DNA甲基转移酶1、3b基因共下调对人胆管癌细胞生长的抑制效应[J].中华实验外科杂志,2006,23(8):912-915,i0001.
作者姓名:左石  罗剑  刘民锋  徐立宁  董泾青  郭伟  邹声泉
作者单位:430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院普外Ⅱ科
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2002AA214061)
摘    要:目的观察联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因真核表达载体对人胆管癌细胞QBC-939生长的影响。初步探讨DNMT1、DNMT3b基因在胆管癌发生中的作用。方法分别构建反义DNMT1基因和反义DNMT3b基因真核表达载体,脂质体介导法将两者联合转入人胆管癌细胞QBC-939,Western blot检测转染前后相应蛋白的表达变化,噻唑蓝(MTT)比色法观察各组细胞生长曲线,流式细胞术观察细胞生长周期及凋亡率的变化,裸鼠皮下种植细胞观察成瘤大小。结果(1)Western blot检测证实转染反义基因能使相应蛋白表达水平降低;(2)联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1能影响QBC-939的生长曲线,使细胞增殖减慢,其中以前者为甚;(3)联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1能影响QBC-939的细胞周期,使之阻滞于G_1期,使细胞凋亡率从(1.63±0.27)%分别增加到(18.47±1.46)%和(6.19±0.78)%;(4)联合转染反义DNMTl、DNMT3b基因和单独转染反义DNMTl能使裸鼠皮下种植成瘤体积减小。生长延缓,前者效果更为明显;(5)在上述效应检测中,联合转染空质粒和单独转染反义DNMT3b基因实验组对QBC-939细胞的生长无明显影响。结论(1)通过联合转染反义DNMT1和DNMT3b基因真核表达载体,可同时下调DNMT1和DNMT3b在QBC-939细胞中的表达,并能在体内外抑制胆管癌细胞的生长,促进凋亡的发生,其效果明显优于单独转染DN—MT1反义基因。(2)在DNA甲基化的过程中,DNMT1起着主要的作用,DNMT3b扮演着协同的角色,两者可能通过甲基化途径与胆管癌的发生有关。

关 键 词:DNA甲基转移酶  胆管肿瘤  反义  脱噬作用
收稿时间:2006-02-02
修稿时间:2006-02-02

Inhibitory effect of down-regulation of DNMT1 and DNMT3b on the growth of human cholangiocarcinoma cell line
ZUO Shi LUO Jian LIU Min-feng.Inhibitory effect of down-regulation of DNMT1 and DNMT3b on the growth of human cholangiocarcinoma cell line[J].Chinese Journal of Experimental Surgery,2006,23(8):912-915,i0001.
Authors:ZUO Shi LUO Jian LIU Min-feng
Institution:ZUO Shi LUO Jian LIU Min-feng. Department of General Surgery,Tongji Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430030,China
Abstract:
Keywords:DNA methyltransferase  Cholangiocarcinoma  Antisense  Apoptosis
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