| 人胚神经干细胞分离培养与鉴定方法 |
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| 引用本文： | 赵荣山,李秀芹,郝京生,董玉环,赵亚朴,王本旭.人胚神经干细胞分离培养与鉴定方法[J].华北国防医药,2004,16(2):80-82,F003. |
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| 作者姓名： | 赵荣山 李秀芹 郝京生 董玉环 赵亚朴 王本旭 |
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| 作者单位： | 北京军区联勤部军事医学研究所微生物检验科 石家庄050081
(赵荣山，李秀芹，郝京生，董玉环)，白求恩军医学院病原教研室 石家庄050081
(赵亚朴)，北京军区联勤部军事医学研究所微生物检验科 石家庄050081(王本旭) |
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| 摘 要： | 目的 :建立神经干细胞 (NSCs)实验室分离、培养方法 ,为NSCs移植提供细胞源。方法 :取 4月龄 (± 15天 )正常孕妇水囊引产胎儿大脑纹状体区组织分离神经干细胞 ,培养于含碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和B2 7的无血清培养基 ;同时利用单细胞克隆技术进行连续传代培养 ;利用形态学观察和免疫荧光技术检测神经上皮干细胞蛋白Nestin抗原的表达来鉴定神经干细胞。结果 :体外培养的干细胞在bFGF和B2 7培养基中可不断增殖形成细胞球 ,并出现少量细胞分化。单细胞培养 4天即开始分裂 ,同时伴有个别细胞分化 ;出现大量神经球一般为 15天 ;分化的细胞在 3 0天开始分解 ,5 0天左右基本消失。细胞培养 3个月 (每月补液 1次 )仍具有分裂增殖能力。单细胞克隆可连续传代 10次 ,仍具增殖分化能力。液氮冻存 6个月的细胞复苏后仍具增殖分化能力。单细胞克隆传代增殖的细胞球经Nestin免疫荧光鉴定 ,呈阳性结果 ,证实其胚胎源性。结论 :采用bFGF和B2 7的无血清培养基能促进神经干细胞连续稳定增殖 ,并有少量分化 ,细胞体外培养 3个月、克隆连续传代 10次情况下的细胞仍具有神经干细胞特性
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| 关 键 词： | 神经干细胞 胚胎 细胞分离 细胞培养 生物学鉴定法 |
| 文章编号： | 1009-0878(2004)02-0080-03 |
Isolation,culture and identification of human embryo neural stem cells |
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| ZHAO Rong shan ,LI Xiu qin ,HAO Jing sheng ,DONG Yu huan ,ZHAO Ya pu ,WANG Ben xu ..Isolation,culture and identification of human embryo neural stem cells[J].Medical Journal of Beijing Military Region,2004,16(2):80-82,F003. |
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| Authors: | ZHAO Rong shan LI Xiu qin HAO Jing sheng DONG Yu huan ZHAO Ya pu WANG Ben xu |
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| Institution: | ZHAO Rong shan 1,LI Xiu qin 1,HAO Jing sheng 1,DONG Yu huan 1,ZHAO Ya pu 2,WANG Ben xu 1. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Neural stem cell Embryo Isolation of cells Cell culture Biological identification |
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