| 抗人B-淋巴细胞刺激因子噬菌体单链抗体库的构建 |
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| 引用本文： | 韩威,田瑞阳,刘惠,姚新生,杨胜利,龚毅.抗人B-淋巴细胞刺激因子噬菌体单链抗体库的构建[J].沈阳药科大学学报,2007,24(11):715-720. |
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| 作者姓名： | 韩威 田瑞阳 刘惠 姚新生 杨胜利 龚毅 |
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| 作者单位： | 1. 沈阳药科大学,生命科学与生物制药学院,辽宁,沈阳,110016
2. 上海中科伍佰豪生物工程有限公司,中国科学院上海生命科学研究院,上海,200233 |
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| 摘 要： | 目的构建抗人B-淋巴细胞刺激因子噬菌体单链抗体库。方法从B-淋巴细胞刺激因子免疫小鼠的脾细胞中抽提总RNA,经逆转录聚合酶反应合成cDNA,分别扩增小鼠重链可变区基因和轻链可变区基因。通过重叠延伸拼接法将重链可变区基因和轻链可变区基因组装成单链抗体基因,重组于载体pFUSE5,电转化E.coliXL 1-Blue。在辅助噬菌体援救下,构建成噬菌体单链抗体库。采用聚合酶链反应、核苷酸序列测定和酶联免疫分析鉴定单链抗体库的特征。结果本抗体库的噬菌体库容量约1×106,单链抗体基因插入效率为93%,存在序列差异性并含有抗B-淋巴细胞刺激因子单链抗体。结论成功地构建了抗人B-淋巴细胞刺激因子单链噬菌体抗体库,为筛选抗B-淋巴细胞刺激因子单链抗体药物奠定了良好的基础。
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| 关 键 词： | 人B-淋巴细胞刺激因子 单链抗体 噬菌体展示技术 聚合酶链反应 |
| 文章编号： | 1006-2858（2007）11-0715-06 |
| 修稿时间： | 2006-12-15 |
Construction of a scFv phage display library from a mouse immunized with human B lymphocyte stimulator |
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| HAN Wei,TIAN Rui-yang,LIU Hui,YAO Xin-sheng,YANG Sheng-li,GONG Yi.Construction of a scFv phage display library from a mouse immunized with human B lymphocyte stimulator[J].Journal of Shenyang Pharmaceutical University,2007,24(11):715-720. |
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| Authors: | HAN Wei TIAN Rui-yang LIU Hui YAO Xin-sheng YANG Sheng-li GONG Yi |
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| Institution: | 1. School of Life Science and Biopharmaceutics, Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016, China ; 2. Shanghai CASB Biotechnology Co. Ltd., Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai, 200233, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human B lymphocyte stimulator(BLyS) single-chain antibodies(scFv) phage display technology polymerase chain reaction |
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