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长爪沙鼠肝细胞体外分离培养体系的建立
引用本文:陈立青,李长龙,郭红刚,萨晓婴,陈振文.长爪沙鼠肝细胞体外分离培养体系的建立[J].实验动物与比较医学,2013,21(5).
作者姓名:陈立青  李长龙  郭红刚  萨晓婴  陈振文
作者单位:浙江省医学科学院,首都医科大学,浙江省医学科学院,浙江省医学科学院,首都医科大学
基金项目:国家自然科学基金项目(面上项目,重点项目,重大项目)
摘    要:目的:建立长爪沙鼠原代肝细胞分离培养体系。方法:以雄性长爪沙鼠肝细胞为供体,采用组织消化法和Seglen两步灌流法分离肝细胞,以台盼蓝染色检测细胞得率和活率,PAS法鉴定肝细胞,倒置显微镜观察肝细胞形态变化,并使用含有多种细胞因子的培养基维持培养。结果:组织消化法和Seglen两步灌流法平均每只长爪沙鼠肝脏分离获得肝细胞分别为(1.33?.34)?07个、(3.97?.15)?07个,细胞活率分别为(29.4?.05)%、(80.3?.56)%,这两种方法在细胞得率及活率方面存在显著差异。肝细胞内因有大量的糖原颗粒,经PAS法染色后被染成红色。结果表明肝细胞在贴壁后72h内,肝细胞形态发生显著变化。结论:采用胶原酶经肝门静脉灌流分离肝细胞是一种高效获得肝细胞的方法。各种细胞因子有利于维持肝细胞在体外的生长分化,长爪沙鼠原代肝细胞分离培养体系的建立将为肝脏相关疾病研究和防治药物的开发提供技术支持。

关 键 词:长爪沙鼠  肝细胞  分离  培养
收稿时间:2013/5/20 0:00:00
修稿时间:2013/6/13 0:00:00

Establishment of the primary cultured protocol on Mongolian Gerbil hepatocytes
Abstract:
Keywords:Mongolian Gerbil  hepatocytes  Isolation  Cultivation
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