长期失神经支配人环杓后肌肌纤维化形态观察及TGF-β1表达研究

目的:探讨长期失神经环杓后肌肌肉形态学变化及纤维化相关因子TGF-β蛋白水平表达的变化,为临床开展晚期喉神经修复及时限的选择提供理论依据.方法:按神经损伤时限将喉返神经损伤患者的环杓后肌标本分为4组:6～12个月组(12例):>1～2年组(10例)、>2～3年组(8例)及>3年组(8例);正常对照组为正常肌肉(12例).通过Masson三色染色观察肌肉形态学变化,通过免疫组织化学荧光染色及图像分析、Western blot观察长期失神经后环杓后肌肌纤维化相关因子TGF-β1表达的时间、空间及强度的变化趋势.结果:Masson三色染色显示:随着失神经时限延长,肌纤维细胞逐渐萎缩,截面积减小,胶原纤维细胞逐渐增加,胶原纤维截面积增加.肌肉截面积/胶原截面积比率逐渐下降.失神经0.5～2年肌肉截面积/胶原截面积比率下降最为明显,但失神经>3年组肌肉相对截面积仍残留36%,为正常对照组的48%.免疫荧光染色显示:TGF-β1在失神经6～12个月组及>2～3年组肌细胞质有较高表达,>1～2年组表达最高,后逐渐下降,3年后基本无表达.失神经各组比较均差异有统计学意义(均P<0.01),失神经>3年组与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).TGF-β1的Western blot结果表明:6～12个月组为正常对照组的4.5倍,>1～2年组达到高峰,为正常对照组的11.4倍,随后缓慢下降;>2～3年组降为正常对照组的6倍;>3年组为正常对照组的1.2倍.结论:失神经2年内进行神经修复可能是阻止肌肉纤维化的最佳时期,但失神经3年后作神经修复仍有其肌肉形态学的基础.

The morphological alteration in myofiber fibrosis and expression in TGF-β1 in long-term denervated posterior cricoarytenoid muscles