Nephrin,podocin及α-actinin在小鼠肾小足细胞系的表达与分布 |
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引用本文: | 范青锋,丁洁,张敬京,管娜.Nephrin,podocin及α-actinin在小鼠肾小足细胞系的表达与分布[J].肾脏病与透析肾移植杂志,2003,12(5):407-411. |
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作者姓名: | 范青锋 丁洁 张敬京 管娜 |
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摘 要: | 目的:探讨nephrin,podocin及α-actinin在小鼠肾小球足细胞系(MPC5)的表达与分布,为进一步研究上述分子间的相互作用建立稳定的实验平台。方法:培养小鼠MPC5,以γ-干扰素诱导在33℃传代增生,继而在37℃培养两周使细胞分化成熟以用于实验研究。相差显微镜观察足细胞形态;免疫荧光染色观察nephrin,podocin,α-actinin及WTl在足细胞的分布;RT-PCR检测足细胞nephrin,podocin及α-actinin4的mRNA;免疫蛋白印迹检测nephrin,podocin,α-actinin及WTl蛋白。结果:成熟足细胞呈星形且有突起形成。免疫荧光及免疫蛋白印迹显示足细胞特异性的表达WTl分子。免疫荧光染色可见nephrin和podocin在足细胞内均呈线状分布于胞膜表面,α-actinin呈细丝状分布于胞质内及伸出的突起中。在mRNA水平及蛋白水平均检测到nephrin,podocin和α-actinin-4表达,其蛋白大小分别为180KDa,45KDa和100KDa。结论:首次在mRNA水平及蛋白水平证实了小鼠MPC5能够表达nephrin,podocin及α-actinin,为进一步研究这些分子间的相互作用奠定了基础。
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关 键 词: | Nephrin podocin α-actinin 小鼠 肾小球足细胞系 γ-干扰素 免疫蛋白印迹 肾小球滤过屏障 |
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