| E型沙眼衣原体持续性感染模型的建立与鉴定 |
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| 引用本文： | 李忠玉,赵钰琦,文雅婷,史可靓,刘怡,粟盛梅. E型沙眼衣原体持续性感染模型的建立与鉴定[J]. 南华大学学报(医学版), 2021, 0(3): 259-264, 280 |
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| 作者姓名： | 李忠玉 赵钰琦 文雅婷 史可靓 刘怡 粟盛梅 |
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| 作者单位： | 南华大学衡阳医学院病原生物学研究所 特殊病原体防控湖南省重点实验室,湖南省衡阳市 421001 |
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| 摘 要： | 目的构建E型沙眼衣原体(Ct)持续性感染细胞模型,为深入研究Ct致病机制提供实验基础。方法用不同剂量人重组干扰素-γ(IFN-γ)处理Ct感染的HeLa细胞,体外诱导Ct持续性感染,间接免疫荧光法检测不同剂量IFN-γ下Ct包涵体形态的变化；移除处理因素,继续培养16 h后观察Ct包涵体形态,并计算Ct包涵体形成单位(IFUs)。实时定量PCR检测Ct DNA修复和重组(dnaA和dnaK)、细菌分裂(ftsK)、蛋白水解和肽转运(oppA.4和htrA)、膜结构(ompA)、发育调节(htcA)和分子伴侣(groEL)等相关基因转录水平。流式细胞术和Hoechst染色检测持续性感染12 h、24 h、40 h时肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导后的HeLa细胞凋亡率。结果75 U/mL IFN-γ可显著降低Ct感染能力,包涵体形态亦发生明显改变；移除IFN-γ后Ct IFUs为(12.60±0.52)×109/L,而未移除IFN-γ组IFUs为(3.60±0.52)×109/L,Ct感染力得到显著提高(P＜0.05)。持续性感染组dnaA、dnaK、groEL、ompA、ftsK和htcA基因转录水平在不同的感染时间发生不同程度的改变；而oppA.4和htrA在急性和持续性感染状态下转录水平差异无显著性(P＞0.05)。凋亡诱导后,与HeLa细胞凋亡率33.63%比较,流式细胞检测Ct持续性感染12 h、24 h、40 h时细胞凋亡率分别为14.77%(P＜0.05)、18.71%(P＜0.05)、26.32%(P＞0.05)；Ct在感染12 h和24 h时呈现抗凋亡效应,随着感染时间延长,衣原体抗凋亡能力下降。结论成功构建IFN-γ诱导的E型Ct持续性感染体外模型,持续性感染状态的Ct能抑制细胞凋亡。
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| 关 键 词： | 沙眼衣原体 持续性感染 细胞凋亡 细胞模型 干扰素-γ |
| 收稿时间： | 2021-01-30 |
| 修稿时间： | 2021-02-26 |
Establishment and identification of persistent infection model of Chlamydia trachomatis serovar E |
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| LI Zhongyu,ZHAO Yuqi,WEN Yating,SHI Keliang,LIU Yi,SU Shengmei. Establishment and identification of persistent infection model of Chlamydia trachomatis serovar E[J]. Journal of Nanhua University(Medical Edition), 2021, 0(3): 259-264, 280 |
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| Authors: | LI Zhongyu ZHAO Yuqi WEN Yating SHI Keliang LIU Yi SU Shengmei |
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| Affiliation: | Pathogenic Biology Institute & Hunan Provincial Key Laboratory for Special Pathogens Prevention and Control, Hengyang Medical College, University of South China, Hengyang, Hunan 421001, China |
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| Keywords: | |
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