基于磁微粒的丙型肝炎病毒抗体快速检测方法的建立

目的开发一种基于磁珠、吖啶酯以及自制生物素化丙型肝炎病毒(HCV)抗原的新型快速诊断方法。方法将生物素化HCV合成抗原包被于磁性微粒,加入待检样品后,再加入吖啶酯标记的兔抗人二抗,经洗涤后加入激发液,激发吖啶酯发出光粒子,并通过专有设备进行检测,评估方法的灵敏度、重现性和稳定性;采用国家血清盘评估方法的准确性,比较与时间分辨免疫荧光法检测试剂盒的一致性。结果建立的基于磁微粒的HCV检测方法,设备样本反应时间/吖啶酯标记反应时间设置为5min/5min;在灵敏度、阴阳性符合率等方面皆符合国家HCV血清盘的质量要求;试剂盒总的变异系数CV高、中、低质量浓度质控分别为4.0%、4.6%、7.6%;试剂盒在37℃存放7d,发光值及S/Co值的变动幅度皆15%;与时间分辨免疫荧光法一致性Kappa值为0.949,具有较高的一致性。结论建立的基于磁微粒的HCV抗体快速检测方法快速、灵敏,具有良好的市场化应用前景。