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| 水蛭ISSR-PCR反应体系的建立及优化 | |
| 引用本文： | 张香东,刘 庚,常素慧,白秀娟,杨洪雁,朱洪强.水蛭ISSR-PCR反应体系的建立及优化[J].中草药,2013,44(2):215-218. |
| 作者姓名： | 张香东 刘 庚 常素慧 白秀娟 杨洪雁 朱洪强 |
| 作者单位： | 1. 吉林农业大学中药材学院,吉林长春,130118 2. 吉林农业大学中药材学院,吉林长春130118;东北农业大学动物科学与技术学院,黑龙江哈尔滨 150030 3. 东北农业大学动物科学与技术学院,黑龙江哈尔滨,150030 |
| 摘 要： | 目的 建立并优化水蛭ISSR-PCR反应体系及扩增程序,为水蛭进行遗传多样性研究提供依据.方法 使用引物ISSR825,采用正交优化方法对影响PCR反应的Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA进行了体系优化,同时对引物的最佳退火温度进行了选择.结果 在25 μL总体积中,其中包括10×PCR缓冲液2.5 μL、Mg2+ 2.0 mmol/L、dNTP0.25 mmol/L、引物0.8 μmol/L、Taq DNA聚合酶2.5 U、模板DNA 2.0 ng/μL,最佳退火温度为49.7℃.结论 所建立的最佳ISSR-PCR反应体系稳定可靠,可用于水蛭遗传多样性评价、不同种源鉴定及亲缘关系分析. |
| 关 键 词： | 水蛭 ISSR-PCR体系 正交设计 体系优化 种质资源 |
Establishment and optimization of ISSR-PCR reaction system for Hirudo nipponica |
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| ZHANG Xiang-dong,LIU Geng,CHANG Su-hui,BAI Xiu-juan,YANG Hong-yan,ZHU Hong-qiang.Establishment and optimization of ISSR-PCR reaction system for Hirudo nipponica[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2013,44(2):215-218. | |
| Authors: | ZHANG Xiang-dong LIU Geng CHANG Su-hui BAI Xiu-juan YANG Hong-yan ZHU Hong-qiang |
| Institution: | 1.College of Chinese Medicinal Materials,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China 2.College of Animal Science and Technology,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Hirudo nipponica Whitman ISSR-PCR system orthogonal design system optimization germplasm resources |
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