| pitx2基因早期过量表达对斑马鱼牙齿生长发育相关基因的影响 |
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| 引用本文： | 陆琼琼,王娟,赵庆顺,李谨. pitx2基因早期过量表达对斑马鱼牙齿生长发育相关基因的影响[J]. 牙体牙髓牙周病学杂志, 2013, 0(1): 6-11 |
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| 作者姓名： | 陆琼琼 王娟 赵庆顺 李谨 |
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| 作者单位： | 杭州口腔医院;南京医科大学口腔医学研究所;南京大学模式动物研究所 |
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| 基金项目： | 江苏省科技厅自然科学基金-面上项目(BK2010528);江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD) |
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| 摘 要： | 目的:研究pitx2基因早期过量表达对斑马鱼牙齿发育相关基因的影响。方法:利用RT-PCR技术克隆pitx2特异性基因片段;插入特异性酶切位点后以之为模板体外合成pitx2 mRNA。选取正常交配获得的斑马鱼胚胎,随机分为4组采用显微注射技术构建pitx2过表达模型:实验1组注射pitx2 mRNA200 pg/nL;实验2组注射pitx2 mRNA 100 pg/nL;实验3组注射YFP mRNA 100 pg/nL作为对照;实验4组为不注射任何基因作为野生型。分别于注射后24、48、72 h观察胚胎发育情况;利用RT-PCR检测5个与斑马鱼牙齿发育相关基因的表达情况。结果:成功克隆含有pitx2基因CDS的片段并体外合成mRNA。显微镜下观察发现:pitx2早期过量表达可造成胚胎发育停止、心包水肿、脊索变形和眼部发育畸形等形态学改变。相关基因检测显示,与对照组和野生型组相比,注射100 pg/nL pitx2 mRNA组bmp4表达明显下调(P<0.05);fgf8、lef1、runx2a表达均明显上调(P<0.05);dlx2b表达各组之间未见明显差异(P<0.05)。结论:pitx2早期过量表达对斑马鱼牙齿发育相关基因的表达有影响。
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| 关 键 词： | 斑马鱼 pitx2 显微注射 半定量RT-PCR |
The effect of pitx2 over expression on the expression of the genes involved in tooth development in the early stage |
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| LU Qiong-qiong,WANG Juan,ZHAO Qing-shun,LI Jin. The effect of pitx2 over expression on the expression of the genes involved in tooth development in the early stage[J]. Chinese Journal of Conservative Dentistry, 2013, 0(1): 6-11 |
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| Authors: | LU Qiong-qiong WANG Juan ZHAO Qing-shun LI Jin |
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| Affiliation: | (Hangzhou Dental Hospital,Hangzhou 310000,China) |
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