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脑心肌炎病毒 TaqMan real-time PCR检测方法的建立及应用
引用本文:张海霞,冯若飞,王丹,凡静静,谢晶莹,马忠仁,冯玉萍. 脑心肌炎病毒 TaqMan real-time PCR检测方法的建立及应用[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2013, 0(9)
作者姓名:张海霞  冯若飞  王丹  凡静静  谢晶莹  马忠仁  冯玉萍
作者单位:1. 730030 兰州,西北民族大学生命科学与工程学院; 西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室
2. 西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室; 730030 兰州,甘肃省动物细胞工程技术研究中心
3. 西北民族大学生命科学与工程学院, 兰州,730030
4. 甘肃省动物细胞工程技术研究中心, 兰州,730030
基金项目:国家自然科学基金项目(31160033);中央高校基本科研业务费专项资金项目
摘    要:目的建立脑心肌炎病毒( EMCV) TaqMan real-time PCR检测方法。方法根据GenBank中公布的EMCV 3D基因保守区段设计并合成1对引物和1条TaqMan 探针,建立EMCV TaqMan real-time PCR检测方法,且对体系进行优化;对该法进行灵敏性、特异性验证;采用建立的方法对98份猪血清样本进行检测,并与ELISA结果进行比较。结果建立的EMCV TaqMan real-time PCR检测方法线性关系较好,以质粒标准品构建的标准曲线相关系数R2为0.995;灵敏性比普通PCR高100倍,且仅能特异性检出 EMCV;对猪血清样本的检测与 ELISA 法检测结果符合率为98.0%。结论已建立了EMCV TaqMan real-time PCR检测方法,该法灵敏性高、特异性好,可用于EMCV的检测及定量分析。

关 键 词:脑心肌炎病毒  实时荧光定量PCR

Establishment and application of a TaqMan real-time PCR assay for the detection of encephalomyo-carditis virus
ZHANG Hai-xia,FENG Ruo-fei,WANG Dan,FAN Jing-jing,XIE Jing-ying,MA Zhong-ren,FENG Yu-ping. Establishment and application of a TaqMan real-time PCR assay for the detection of encephalomyo-carditis virus[J]. Chinese Journal of Microbiology and Immunology, 2013, 0(9)
Authors:ZHANG Hai-xia  FENG Ruo-fei  WANG Dan  FAN Jing-jing  XIE Jing-ying  MA Zhong-ren  FENG Yu-ping
Abstract:
Keywords:Encephalomyocarditis virus ( EMCV)  Real-time PCR
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