| 人Survivin蛋白的表达?纯化及初步应用 |
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| 引用本文： | 李 烜,梁文飚,孙倍成,吴 华.人Survivin蛋白的表达?纯化及初步应用[J].南京医科大学学报,2008,28(10):1267-1271. |
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| 作者姓名： | 李 烜 梁文飚 孙倍成 吴 华 |
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| 作者单位： | 南京中医药大学第一附属医院普外科，江苏省血液中心，南京医科大学第一附属医院普外科，南京中医药大学中医临床系 |
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| 摘 要： | 目的:克隆、表达肿瘤特异性凋亡抑制因子(Survivin),并对其在人肝癌诊断中的意义进行研究。方法:从人白血病细胞系HL60提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出Survivin基因片段。将Survivin基因片段插入载体pMD-18T中,测序正确后亚克隆到原核表达载体pGEX-2TK中。IPTG诱导重组质粒pGEX-2TK-Survivin在大肠杆菌BL21中表达N端融合GST的目的蛋白,采用GST蛋白纯化系统进行纯化,经SDS-PAGE分析后,将所得产物用Thrombin裂解后进行Westernblot鉴定。将获得的目的蛋白包板,用ELISA法初步检测了肝癌患者血清中抗Survivin蛋白的表达。结果:克隆了人Survivin基因、表达出相对分子质量约为16.2ku的蛋白并进行了肝癌患者血清的检测应用。结论:成功克隆、表达和纯化了Survivin基因和融合蛋白,为进一步探讨以Survivin为基础的肿瘤诊断和治疗奠定了实验基础。
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| 关 键 词： | Survivin 基因克隆 蛋白纯化 HCC |
| 收稿时间： | 2008/5/22 0:00:00 |
The expression,purification and preliminary use of human Survivin protein |
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| LI Xuan,LIANG Wen-biao,SUN Bei-cheng and WU Hua.The expression,purification and preliminary use of human Survivin protein[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2008,28(10):1267-1271. |
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| Authors: | LI Xuan LIANG Wen-biao SUN Bei-cheng and WU Hua |
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| Institution: | Department of Surgery,The Jiangsu Province Traditional Chinese Medical Hospital,Nanjing 210029;The Jiangsu Province Blood Centre,Nanjing 210042;Department of Surgery,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029;The Department of TCM, The Nanjing Chinese Medical University,Nanjing 210046,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Survivin cloning protein purification HCC |
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