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两种分离脐血间充质干细胞的方法比较
引用本文:高杨,李立,冉江华,陈奕明,蒋益舟.两种分离脐血间充质干细胞的方法比较[J].中国组织工程研究与临床康复,2011,15(19):3472-3475.
作者姓名:高杨  李立  冉江华  陈奕明  蒋益舟
作者单位:昆明市第一人民医院肝胆胰一科,云南省昆明市,650011
摘    要:背景:目前分离脐血间充质干细胞的方法很多,尚没有确定一种为最有效的方法。目的:寻找一种最为可靠的脐血间充质干细胞分离方法。方法:应用Percoll分离液法和羟乙基淀粉沉降法对脐血进行分离得到单核细胞,在含体积分数15%新生牛血清的DMEM/F12培养基中进行培养并传代。观察不同分离方法脐血单核细胞的回收率,每次传代的时间和细胞增值速度,培养过程中间充质干细胞形态的变化情况,并用流式细胞仪检测第3代细胞表面标志物CD90、CD44、CD34的表达。结果与结论:与Percoll分离液法相比羟乙基淀粉沉降法获得的单核细胞多,单核细胞回收率高(P<0.01),第1次传代时间短(P<0.01)。然而两种方法获得的细胞经培养在形态的变化和表面标志物CD90、CD44、CD34的表达上差异并无显著性意义(P>0.05)。所以羟乙基淀粉沉降法的分离效率较高,培养时间短,但是并不能获得质量较高的脐血间充质干细胞。

关 键 词:脐血  间充质干细胞  分离  Percoll分离液法  羟乙基淀粉沉降法

Comparison of two isolation methods for umbilical cord blood mesenchymal stem cells
Gao Yang,Li Li,Ran Jiang-hua,Chen Yi-ming,Jiang Yi-zhou.Comparison of two isolation methods for umbilical cord blood mesenchymal stem cells[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2011,15(19):3472-3475.
Authors:Gao Yang  Li Li  Ran Jiang-hua  Chen Yi-ming  Jiang Yi-zhou
Institution:First Department of Hepatobiliary,First People’s Hospital of Kunming City,Kunming 650011,Yunnan Province,China
Abstract:BACKGROUND: There is no standard method to isolate umbilical cord blood mesenchymal stem cells (MSCs).OBJECTIVE: To discuss an optimized isolation method of human umbilical cord blood MSCs.METHODS: Monocytes were isolated from umbilical cord blood using the Percoll separation medium method and hydroxyethyl starch sedimentation respectively.Cells were cultured in DMEM/F12 containing 15% newborn calf serum.The main outcome indictors were recovery rate of monocytes,generation time,cell proliferation,morphologi...
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