HDAC2的表达水平评分与胆道闭锁肝纤维化进展及预后的关系北大核心CSCD

目的探究组蛋白脱乙酰酶(histone deacetylase,HDAC)2在胆道闭锁(biliary atresia,BA)患儿肝组织中表达水平、诊断价值及其与BA肝纤维化进展和预后的关系。方法回顾性分析2019年1月至2021年12月因黄疸在天津市儿童医院普外科行手术治疗的患儿44例,包括BA患儿34例(BA组)和其他胆汁淤积性肝脏疾病10例(DC组)。使用生物信息学分析HDAC中HDAC1~HDAC11在BA中的表达情况。取BA组和DC组患儿肝组织样本,通过免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR检测HDAC2在两组患儿肝组织中表达水平,对HDAC2的表达进行评分。使用受试者操作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估HDAC2评分对BA的诊断价值。分析BA患儿HDAC2表达与一般临床资料的关系。所有BA患儿在Kasai术后均进行了随访,记录术后6个月时的黄疸清除率(jaundice clearance rate,JCR)和自体肝生存率(survival with native liver rate,SNL)。采用Cox比例风险回归、Kaplan-Meier法分析HDAC2表达与JCR和SNL的关系。结果生物信息学分析显示,与DC组相比,BA组中HDAC的mRNA表达含量丰富,其中HDAC2差异具有统计学意义(log2FC=0.61,P=0.002)。免疫组织化学染色结果显示,BA组肝组织中HDAC2表达定位于多数肝细胞和胆管上皮细胞的细胞核内,而DC组肝组织内仅少量肝细胞和胆管上皮细胞核有表达。实时荧光定量PCR结果显示,BA组肝组织中HDAC2(15.58±2.32)比(1.42±0.42),P<0.001]、ACTA2(2.561±0.328)比(1.150±0.196),P<0.001]和KRT19(2.324±0.367)比(1.116±0.164),P=0.005]mRNA相对表达量高于DC组。DC组与BA组的HDAC2评分之间差异存在统计学差异3.0(3.0~5.0)分比8.5(6.0~10.0)分,P<0.001];BA组纤维化分级Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级的HDAC2评分之间差异有统计学意义5.5(5.0~8.0)分比9.0(7.0~10.0)分,P=0.005]。HDAC2评分诊断BA的ROC曲线下面积为0.925(95%CI:0.846~1.000,P<0.001)。HDAC2高表达患儿和低表达患儿的SNL差异有统计学意义(P=0.007)。多变量Cox回归分析显示,Kasai手术日龄较大(HR:3.764,95%CI:1.239~11.428,P=0.019)和HDAC2高表达(HR:4.883,95%CI:1.296~18.392,P=0.019)是BA预后不良独立危险因素。结论HDAC2的表达水平评分具有潜在诊断价值,与BA肝纤维化程度有关;同时其高表达可以提示不良预后,为BA的诊断、预后评估带来新思路。