粪肠球菌介导的铜绿假单胞菌重组疫苗诱导小鼠的保护力及细胞免疫应答北大核心CSCD

目的研究基于粪肠球菌(Ef)载体的铜绿假单胞菌(Pa)重组疫苗rEf(pGEX-LasR)诱导小鼠的保护力及细胞免疫应答。方法分别将5×10^(9)CFU的疫苗株、空载体株和Ef株菌液口服灌胃免疫BALB/c鼠,每周3次,连续3周;初次免疫后4周用5×10^(7)CFU的Pa01株菌液滴鼻攻击小鼠,2周后杀鼠剖检;菌落计数检测小鼠肺细菌负荷,MTT法检测小鼠脾细胞增殖水平,荧光激活细胞分选仪(FACS)检测小鼠脾细胞CD4^(+)/CD8^(+)T细胞亚群和脾细胞凋亡水平;采用PaAg体外刺激培养小鼠脾细胞48 h,PCR扩增IL-2、IFN-γ、IL-12、IL-17和Fox3^(+)基因。结果疫苗组、空载体组和Ef对照组小鼠肺细菌负荷分别为(7.616±0.010)lgCFU/g、(8.876±0.011)lgCFU/g和(8.902±0.010)lgCFU/g,疫苗组显著降低(P<0.01);与空载体组和Ef对照组比较,疫苗组小鼠脾细胞CD4^(+)T细胞亚群显著增加(P<0.01),脾细胞增殖活性增强(P<0.01)、凋亡率减低(P<0.01);疫苗组小鼠脾细胞DNA可扩增出IL-2、IFN-γ、IL-12、IL-17和Fox3^(+)基因条带,空载体组和对照组未扩增出条带。结论Pa重组疫苗rEf(pGEX-LasR)可诱导小鼠产生细胞免疫应答,促进小鼠脾细胞IL-2、IFN-γ、IL-12、IL-17和Fox3^(+)基因的表达,降低Pa01攻击小鼠后的肺细菌负荷。