| TaqMan PCR检测乙型脑炎病毒方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 阳帆,刘建军,何建凡,杨洪,张海龙,冼慧霞.TaqMan PCR检测乙型脑炎病毒方法的建立及应用[J].中国卫生检验杂志,2008,18(10). |
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| 作者姓名： | 阳帆 刘建军 何建凡 杨洪 张海龙 冼慧霞 |
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| 作者单位： | 广东省深圳市疾病预防控制中心,广东深圳,518020 |
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| 摘 要： | 目的:利用TaqMan PCR技术,建立乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)实时荧光PCR检测方法,探讨其用于临床诊断的可行性.方法:根据GenBank发表的JEV全基因组序列资料分析结果,在其3'端非编码区(UTR)设计JEV特异的引物与探针,验证检测体系的特异性、灵敏性和稳定性,并用于临床乙脑病人样本的检测.结果:引物、探针具有良好的特异性,用该TaqMan PCR法检测JEV减毒株SA14-14-2灵敏度可达1 TCID50/ml.稳定性分析表明,同一样本重复检测5次,Ct值变异系数均小于5%.在此基础上,实时荧光PCR检测了10份临床上确诊为乙脑患者的标本(特异性IgM阳性),6份阳性,阳性率为60%.在7份特异性IgM阴性、临床上疑似乙脑的患者中,2份TaqMan PCR结果为阳性,阳性率为28.6%.此方法从RNA提取到检测结果仅需1.5 h.结论:本研究建立了一种灵敏、特异、简便易行的JEV TaqMan PCR检测方法,为乙型脑炎的鉴别诊断提供了一种技术手段.
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| 关 键 词： | 乙型脑炎病毒 实时荧光PCR |
Establishment and application of a TaqMan PCR method for detection of Japanese encephalitis virus |
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| Yang Fan,Liu Jian-jun,He Jian-fan,Yang Hong,Zhang Hai-long,Xian Hui-Xia.Establishment and application of a TaqMan PCR method for detection of Japanese encephalitis virus[J].Chinses Journal of Health Laboratory Technology,2008,18(10). |
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| Authors: | Yang Fan Liu Jian-jun He Jian-fan Yang Hong Zhang Hai-long Xian Hui-Xia |
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