| 人角质形成细胞体外扩增与生物学特征变化 |
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| 引用本文： | 邓辰亮,杨光辉,崔磊,杨军,刘伟,曹谊林. 人角质形成细胞体外扩增与生物学特征变化[J]. 上海交通大学学报(医学版), 2004, 24(4): 299-301,318 |
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| 作者姓名： | 邓辰亮 杨光辉 崔磊 杨军 刘伟 曹谊林 |
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| 作者单位： | 上海第二医科大学第九人民医院整复外科,上海市组织工程研究与开发中心,上海,200235;上海第二医科大学第九人民医院整复外科,上海市组织工程研究与开发中心,上海,200235;上海第二医科大学第九人民医院整复外科,上海市组织工程研究与开发中心,上海,200235;上海第二医科大学第九人民医院整复外科,上海市组织工程研究与开发中心,上海,200235;上海第二医科大学第九人民医院整复外科,上海市组织工程研究与开发中心,上海,200235;上海第二医科大学第九人民医院整复外科,上海市组织工程研究与开发中心,上海,200235 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 目的研究人角质形成细胞体外扩增过程中生物学特征的变化,观察其角蛋白19(K19)mRNA表达及克隆形成率与扩增受限的关系.方法取2～3岁健康儿童包皮20例,通过2.4 U/mL dispase和0.05%胰酶(tripsin)分离,获得角质形成细胞体外培养.细胞计数仪计数描绘生长曲线.光镜观察细胞体外扩增过程中形态学改变,同时计数克隆形成率.RT-PCR检测角质形成细胞K19和Involucrin的mRNA表达情况.结果儿童包皮角质形成细胞体外平均最大扩增能力为(700±37)倍.细胞平均获得率为(1.64±0.297)×106/cm2包皮.角质形成细胞原代(P0)、第2代(P2)、第4代(P4)、第5代(P5)克隆形成率分别为:(45±4)%,(37±4)%,(28±3)%,(9±2)%,第6代(P6)克隆形成率消失.RT-PCR检测发现P0、P2、P4、P5有K19 mRNA 表达,P6未见表达;Involucrin各代均可见表达.结论人角质形成细胞体外扩增能力随传代逐渐降低,扩增受限与角质形成细胞中K19 mRNA表达及克隆形成率消失相关.
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| 关 键 词： | 角质形成细胞 扩增 组织工程 |
Proliferation and biological character changes of human keratinocytes cultured in vitro |
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